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常用培养基配方

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4903

1 GN增菌液

成分:
胰蛋白胨 20g
葡萄糖 1g
甘露醇 2g
柠檬酸钠 5g
去氧胆酸钠 0.5g
磷酸氢二钾 4g
磷酸二氢钾 1.5g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
pH7.0
制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶225mL,115℃高压灭菌15min。

2 肠道菌增菌肉汤

成分:
蛋白胨1 10g
葡萄糖 5g
胆盐 20g
磷酸氢二钠 8g
磷酸二氢钾 2g
煌绿 0.015g
蒸馏水 1000mL
pH7.2
制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min。

3 亚硫酸铋琼脂(BS)

成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
葡萄糖 5g
硫酸亚铁 0.3g
磷酸氢二钠 4g
煌绿 0.025g
柠檬酸铋铵 2g
亚硫酸钠 6g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000mL
pH7.5

制法:

1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。

2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。

3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃

4 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀。冷至50~55℃,倾注平皿。

注:此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热。以免降低其选择性。应在临用前一天制备,贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。


44 DHL琼脂
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
去氧胆酸钠 1g
硫代硫酸钠 2.3g
柠檬酸钠 1g
柠檬酸铁铵 1g
中性红 0.03g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000mL
pH7.3
制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH。 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55℃,倾注平板。

45 HE琼脂
成分:
脙胨 12g
牛肉膏 3g
乳糖 12g
蔗糖 12g
水杨素 2g
胆盐 20g
氯化钠 5g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000mL
0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL
Andrade指示剂 20mL
甲液 20mL
乙液 20mL
pH7.5
制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内,校正pH。再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板。
注:①此培养基不可高压灭菌。
②甲液的配制
硫代硫酸钠 34g
柠檬酸铁铵 4g
蒸馏水 100mL
②乙液的配制
去氧胆酸钠 10g
蒸馏水 100mL
②Andrade指示剂
酸性复红 0.5g
1mol/L氢氧化钠溶液 16mL
蒸馏水 100mL
将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2mL。

46 SS琼脂
基础培养基:
牛肉膏 5g
眎胨 5g
三号胆盐 3.5g
琼脂 17g
蒸馏水 1000mL
再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用。
完全培养基:
基础培养基 100mL
乳糖 10g
柠檬酸钠 8.5g
硫代硫酸钠 8.5g
10%柠檬酸铁溶液 10mL
1%中性红溶液 2.5mL
0.1%煌绿溶液 0.33mL
加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。
注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用。
②煌绿溶液配好后应在10d以内使用。
③可以购用SS琼脂的干燥培养基。


47 WS琼脂
成分:
②胨 12g
牛肉膏 3g
氯化钠 5g
乳糖 12g
蔗糖 12g
十二烷基硫酸钠 2g
琼脂 15g
Andrade指示剂 20mL
0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL
甲液 20mL
蒸馏水 1000mL
pH7.0
制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色。
注:①供沙门氏菌分离用。
②Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂。

48 麦康凯琼脂
成分:
蛋白胨 17g
眎胨 3g
猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g
氯化钠 5g
琼脂 17g
蒸馏水 1000mL
乳糖 10g
0.01%结晶紫水溶液 10mL
0.5%中性红水溶液 5mL
制法:
1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2。将琼脂加入600mL
加热溶解。将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用。
2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50~55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板。
注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。

49 伊红美蓝琼脂(EMB)
成分:
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 17g
2%伊红Y溶液 20mL
0.65%美蓝溶液 10mL
蒸馏水 1000mL
pH7.1
制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。

50三糖铁琼脂(TSI)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 5g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O〕 0.2g
硫代硫酸钠 0.2g
琼脂 12g
酚红 0.025g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。

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