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免疫学基本实验操作

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1. 家兔心脏穿刺采血法

(1)一个人固定兔子用两腿夹住兔子的两条后腿,两手握住两前腿,使家兔前胸尽量向前突。

(2)用剪刀去左前胸的毛,以碘酒消毒,再用酒精棉球擦去碘酒。

(3)先用手指按摸心脏搏动最强部位(约在左侧胸骨的第三肋间)将针头刺入,如已刺入心脏则可见针头随心脏搏动而上下跳动,此时轻轻抽动注射器,可见血液涌出。

(4)一般家兔抽取30~50毫升仍可生存,如不需保存动物可抽取80~120毫升。

2. 家兔颈动脉放血法

(1)将家兔仰卧固定,使头部后仰,整个颈部伸直露出,用消毒液擦拭,除颈部外的其它部位用消毒湿纱布覆盖起来将颈下皮肤纵向切开,剥离皮下组织,分离肉与气管,在颈静脉下可见迷走神经平行强烈搏动的动脉血管。

(2)将血管周围的结缔组织分离后,用止血钳夹死上下两端,在两钳中间切断血管,再用镊子夹住心端,然后在钳子和镊子中间的血管壁上斜开小口,放入采血瓶中松动镊子,血液便可留入瓶中。

(3)放血速度可由镊子掌握,以免过快发生溶血。(此法可 用于豚鼠的全采血,也可用于牛马羊等大动物)

3. 家兔耳静脉采血法

轻弹兔耳,再用75%酒精深擦,使其充血和消毒,然后刺破静脉,用注射器轻轻抽取血液。

4. 血液分离方法

分离血清通常心脏采血,也可由颈动脉放血。

(1)将抽的血收集在无菌三角烧瓶或无菌小克氏瓶中,令其凝固,贴壁。

(2)置冰箱内24~48小时,待血块收缩后,用无菌吸管吸出上层澄清血清。

(3)用无菌玻璃棒将血块与容器壁分开,又可释出一部分血清,但这部分血清可能含有血球,需离心沉淀除去血球。以吸管吸取
上层血清。

(4)取出的血清可测定效价加以注明供使用时参考,于灭菌后加入0.5%石灰酸或0.01%硫化汞等防腐剂,保存于冰箱中备用。

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