瞬转是否可以使用电穿孔

shally1108：我要做神经母细胞瘤细胞和神经胶质瘤细胞的转染。本来是用LP2000，现在想试试电转，只做瞬时表达看绿荧光就行，不需筛选。

请问肿瘤细胞的瞬时转染合适吗？把细胞消化后只用PBS重悬可以吗？电压电阻大概多少？

丁香园网友shally1108认为：

还有个问题，实验室用的是细胞电融合仪ECM2001（BTX），它的转染杯是仪器配套可重复使用的还是一次性用自己另外买的？

此外，我的质粒是14kb，不知用电转合不合适？急啊！请各位帮忙解惑

丁香园网友犯罪现场调查认为：

我也是电转染肿瘤细胞。电转染一般用于悬浮细胞。不过我的细胞是贴壁细胞。电转染也成功了。

1 在转染前先消化，然后用培养液吹打制成悬液

2 因为电转染不如脂质体转染效率高。所以我转染的细胞浓度比较大。undefined106次方个

3 使用电转染仪配套的4mm电转染杯（每次之前用酒精泡，时间上不太固定。时间不要太长，以免破坏杯体的有机成分，比如黏胶成分。）然后紫外消毒最少30分钟，有条件的话用时最好用培养液冲洗一遍。只要无菌操作没问题应该不会污染。当然，如果有钱，买一次性的更好了。少了前面的工序。

4 因为我的电转染仪和你的不同，所以你的摸条件。不过我可以告诉你我的条件

300v 500欧1000uf 或300v 500欧1250uf.电压尽量不要太高。我摸过条件，高于400细胞基本死光光。电容尽量高。这样会延长电击时间，增加转染效率。

5 当然，这是我的经验不一定适合你，关键还得自己摸索。

还有，电击后会有部分细胞电击成碎片。所以用枪移走杯中细胞时尽量吹打底部。因为大量细胞会在底部沉淀。