是否瞬转成功的检测

zhou0958求助：是否瞬转成功的检测

我现在想做瞬转，然后24，48，72小时后检测转染的载体对细胞增殖的影响.我所转染的是连有目的片段的PCDNA3.1载体，这种载体是不带荧光的.请问各位大侠，我该用什么方法来检测我的转染是否成功呢?

DXY721认为

检测转染成功与否的方法很多，流式，RT-PCR，WB应该都可以

easticebird建议

是不是可以和有荧光的一起转染，做个对照呢

他们有经验的师姐说，转染成功的细胞，状态会变差，变差的可能就转进去了

普通学生建议

可以先使用有荧光蛋白的空载体验证整个系统的转染效率，用流式检测就可以了，非常方便。确定转染效率没有问题后可以转染带有目的基因的质粒。

对于转染效果的验证主要取决于你的目的蛋白的性质。主要是mRNA和蛋白水平的验证。mRNA水平可以使用普通PCR或者定量PCR，前者是定性，后者定量。但是最主要的还是蛋白水平的检测，如果是膜蛋白，那么流式检测最方便，如果是胞外分泌型那么可以用上清做ELISA或者Western都可以，如果是胞浆分泌型的那么就用Western或者流式都可以。