HLA-undefined27基因检测在强直性脊柱炎诊断中的重要意义

什么是HLA-B27

HLA即人类白细胞抗原(Human Leukocyte Antigen)。该抗原是人类主要组织相容性复合体（Major Histocompatibility Complex, MHC）的组织抗原（膜相关糖蛋白），在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答。

HLA基因位于人类第6号染色体上。HLA I类分子包括HLA-A、-B、-C，广泛分布于各组织有核细胞表面；HLA-undefined27就是属于HLA-I类基因中B座位上的第27主型。

IMGT/HLA database显示目前已发现HLA-undefined27有130种亚型，从HLA-undefined27:01到HLA-undefined27:105，各种亚型之间仅仅是少数几个碱基的差别。HLA II类分子包括HLA-DR、-DP、-DQ系列抗原，主要表达于抗原提呈细胞表面。在组织或器官移植过程中，HLA II类分子是引起移植排斥反应的重要靶抗原。

HLA-B27与强直性脊柱炎的关系

强直性脊柱炎（Ankylosing Spondylitis,AS）是脊柱性关节炎的一种。后者是一组慢性炎症性风湿性疾病，除AS外还包括反应性关节炎、银屑病关节炎、炎症性肠病性关节炎、未分化脊柱关节炎和幼年慢性关节炎。HLA-B27与这一大类疾病有着不同程度的相关性。

HLA-B27与AS的相关性最高，是该疾病的一个高灵敏度的诊断指标。超过90%的AS患者其HLA-B27抗原表达为阳性，而普通人群中仅5-10%的阳性率。

进一步研究发现，在众多的HLA-undefined27亚型中某些基因型如HLA-undefined27:02, HLA-undefined27:04和HLA-undefined27:05亚型与AS的相关性最强，而HLA-undefined27:06和HLA-undefined27:09亚型与AS的发病呈负相关，已有文献表明这两种亚型属于AS的保护性基因。

由此可见，HLA-undefined27基因检测不但对疾病的诊断有高度的检测敏感性，还具有极高的阴性预测价值，而且其分型检测对AS与类似症状疾病的鉴别诊断也有重要的辅助作用。

但是应当看到，仅有3%-6%的HLA-undefined27基因携带者发展成AS，提示除遗传因素外，还有其他因素影响该疾病的发生，因此HLA-undefined27是AS发病中的一个重要的遗传因素，但并非导致本病的唯一因素。

HLA-B27 的实验室检测

目前常规检测HLA-B27抗原的方法有微量淋巴细胞毒法和流式细胞技术。前者是经典的检测方法，也已成为之后发展新方法的参照标准，但缺点是蛋白检测的敏感性不够高，需要新鲜活细胞样本，操作繁琐，结果判读中的主观因素影响较大，同时抗原抗体结合中的HLA-B7的交叉反应也影响了结果的特异性。

目前广泛接受的基于流式细胞技术的检测方法，虽然在结果判读上实现了客观化、标准化和自动化，相对于前者是一个很大的进步，但仍然无法解决交叉反应和一定要使用新鲜样本的问题。

采用分子生物学方法可以对患者HLA-undefined27 基因进行精确的测定，将在AS的临床诊断上有很重要的应用价值。基因检测相对于抗原检测更能有效避免HLA-B7的交叉反应，实现无关亚型的鉴别诊断。该技术不要求新鲜活细胞，因此可以收集样本集中检测，有效节省人力成本和试剂成本。

欧蒙微阵列（EUROArray）是基于高敏感性基因扩增的基因芯片技术，通过序列特异性引物和探针，实现检测结果的高特异性，而且借助成熟的滴定平板技术和大量的质控探针，通过自动化设备的应用，可以满足临床检测高通量、标准化的需求。

欧蒙微阵列HLA-undefined27检测，直接采用全血样本，无需额外的DNA提取过程，可以检测目前所有的HLA-undefined27亚型，同时可有效鉴别与AS发病不相关的亚型，确保对疾病诊断的高度特异性。