罗红霉素的犬体药代动力学及相对生物利用度研究

互联网2012-08-23

3127

药物-机体相互作用一方面是药物对机体的作用，产生药效、毒性或副作用，表现为药物的药理作用或毒理作用，决定于特定的化学结构，具有较强的结构特异性。另一方面是机体对药物的作用：吸收、分布，生物转化和排泄，表现为药物的药代动力学性质。

主要取决于药物的溶解性、脂水分配系数、电荷等药物分子整体的理化性质，结构特异性不强。药代动力学是应用数学模型和计算公式阐明药物的体内过程随时间而改变的量变规律，从而揭示药物在体内的位置（房室）、浓度与时间的关系。

实验目的

1，掌握微生物法测定罗红霉素血药浓度的基本原理与操作。

2，熟悉相对生物利用度的测定。

3，了解罗红霉素的动物药代动力学研究过程。

实验材料

1，动物

健康犬12只，♂，体重12kg左右，由安徽医科大学实验动物中心提供（皖医实动准第01号）。

2 ，药品

罗红霉素片，商品名罗迈新，丽珠集团丽珠制药厂，规格150mg/片，批号020602。

罗红霉素片，商品名浦虹，上海医药工业研究院亚东药业公司浦东药厂，规格150mg/片，批号020601。

罗红霉素标准品，含量949.5（u/mg），批号020205M。

3 ，检定菌

藤黄微球菌标准菌株CMCC（B）28001，卫生部药品生物制品检验所提供。

4，试剂

磷酸盐缓冲液（pH6.0），安徽医科大学第一附属医院检验科临床微生物室配制，过滤，115℃高压30分钟。

培养基Ⅱ，安徽医科大学第一附属医院检验科临床微生物室配制，过滤，115℃高压30分钟。

营养琼脂干粉，杭州天和微生物试剂厂，按其说明书配制，用于转种藤黄微球菌标准菌株和细菌菌落计数。

实验方法

1，标准曲线制备

将已高压灭菌的培养基Ⅱ加热溶解后倾入无菌培养皿，藤黄微球菌标准菌株菌液（104-105CFU/ml）均匀涂抹无菌培养皿，置35℃温箱10-20分钟。用直径为3.5mm打孔器在培养皿打2孔，用于加入标准品及血浆样品。

精密称取罗红霉素标准品50mg，用1ml无水乙醇溶解后，加入4mlPH6.0磷酸盐缓冲液，制成储备液（1000 mg·l-1）。

取0.1ml储备液加入9.9mlPH6.0磷酸盐缓冲液，制成中间液体（100 mg·l-1），用犬血浆稀释成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625mg·l-1，取20ul加入上述孔中，置35℃温箱16小时，用游标卡尺测量抑菌环直径（mm）。

以抑菌环直径D为横坐标，浓度C（mg·l-1）的对数为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为：lgC=-1.219+0.083D，r =0.9958。

2，回收率试验

分别制备高、中、低3种浓度的罗红霉素血浆样品，按标准曲线制备项下方法操作，将抑菌环直径代入标准曲线计算罗红霉素浓度，以测得值与加入值之比计算回收率。

3，精密度试验

分别制备高、中、低3种浓度的罗红霉素血浆样品，按标准曲线制备项下方法操作，1日内连续测定5次，计算日内相对标准差；将制备的高、中、低3种浓度的罗红霉素血浆样品连续测定5日，计算日间相对标准差。

4，药动学试验方案

12只犬随机分为2组，每组6只，用药前禁食12小时，用药后禁食4小时，禁水2小时。供试药物组与对照药物组分别灌胃浦虹、罗迈新2片（150mg×2），分别于0h（给药前）及给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、18、24、36、48、60、72h。

采血3ml，血标本收集于一次性肝素抗凝的负压真空采血管（成都瑞琪C.D.RICH产品，批号020313）内，离心（3000r?min-1，10min）分离出血浆，血浆样品保存于-20℃待测。血药浓度测定方法同标准曲线。

5，数据处理

血药浓度-时间数据采用3p87药代动力学软件计算。峰浓度（Cmax）和达峰时间（Tmax）为实测值，对浦虹和罗迈新的主要药代动力学参数采用配对t检验进行统计分析，以罗迈新药时曲线下面积为标准，计算浦虹的相对生物利用度。