厄贝沙坦胶囊的人体生物利用度实验设计
互联网
5931
厄贝沙坦是AT1受体阻断剂，临床上用于高血压病的治疗。由于该药疗效确切，在治疗剂量下（常用量为50-300 mg/d，耐受量>900 mg/d），几乎无不良反应，因此可望成为抗高血压的一线药物。药代动力学研究表明，厄贝沙坦胶囊口服吸收较快（Tmax 1.5-2h），其绝对生物利用度约为60%-80%，半衰期t1/2 约为11-16 h，该药主要通过代谢后从尿中排出体外，原形肾排不到3%。
试验目的
本试验旨在研究国产厄贝沙坦胶囊的相对生物利用度，为它是否与剂量相同的进口厄贝沙坦胶囊具有生物等效性提供依据。
生物样品分析方法的建立和验证
采用HPLC法测定血药浓度
1，样品制备：样品制备过程中，高、中、低三个浓度的提取回收率高于50%
2，HPLC测定条件：
3，特异性：
须证明所测定物质是受试药品的原形药物。生物样品所含内源性物质或代谢物不得干扰对样品所测物质的分析。应提供空白生物样品、标准品、空白生物样品加入标准品及用药后生物样品的色谱图，以反映分析方法的特异性。
4，最低定量限：
最低定量限（LOQ）是标准曲线上的最低浓度点，又称灵敏度，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度（应能满足测定3-5个半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax1/10~1/20时的药物浓度）。
5，标准曲线与线性范围
所测定物质的浓度与响应的相关性，用回归分析方法（如用加权最小二乘法）所得的回归方程来评价。
标准曲线高低浓度范围为线性范围，在线性范围内浓度测定结果应可达到试验要求的精密度和准确度。必须用至少5个浓度建立标准曲线，应使用与待测样品相同生物介质，线性范围要能覆盖全部待测浓度，不得用线性范围外推的方法求算未知样品的浓度。标准曲线不包括零点。
6，精密度与准确度
要求选择三个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察，低浓度选择在最低量限（LOQ）附近，高浓度在标准曲线的上限附近，中间选一个浓度，每一浓度至少测定5个样品。精密度用质控样品的日内和日间相对标准差（RSD）表示，一般RSD应小于15%，在LOQ附近RSD应小于20%。
准确度是指用特定方法测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度，可用相对回收率表示，一般应85%~115%范围内，在LOQ附近应在80%~120%范围内。
7，样品稳定性
对含药生物样品在冰冻条件下不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存放时间。,
8，质控样品
质控样品系将已知量的待测药物加入到生物介质中配制的样品，用于质量控制。一般配制高、中、低三个浓度的质控样品。
9，质量控制
应在生物样品分析方法确证完成之后开始测试未知样品。每个未知样品一般测定一次，必要时可进行复测。每批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。质控样品测定结果的偏差一般应小于20%。
志愿受试者
1，志愿受试者条件
性别：男性；
年龄：18~40岁；
体重：标准体重±10%。 [标准体重=身高(cm)－80]×0.7；或=[身高(cm)－170]×0.6+62。全部受试者的体重尽量控制在55-65kg范围内；
不吸烟；
不嗜酒；
经病史询问、全身体检和实验室检查证明健康者；
无药物过敏史和精神病史；
无药物依赖史；
至少两周未服用其它任何药物；
受试期间禁服任何药物；
2，受试者例数：20例。
3，分组方案：
4，签署知情同意书。
参比制剂
Sinofi Pharma 生产的厄贝沙坦片剂，每片150 mg，批号：173
试验制剂
国产厄贝沙坦胶囊，每粒75 mg，批号：
给药方案
1、剂量：两制剂均给150 mg。
2、给药方案：采用双周期随机交叉试验设计，给药方案见表2。
3、洗脱期：1周。
4、取血点：服药前（0小时）、服药后0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，4，8，12，24，36，48，60小时从静脉采血3 ml。立即离心，血浆储存在-20°C保存。详细记录采血准确时间。
预试验（略）
数据处理
（一）、药代动力学基本参数的计算：
1. AUC0→60：梯形面积法，单位：mg×h/ml；
2. AUC0→€ = AUC0→60 + C60/K；
3. 消除速率常数(Ke)：以二乘法求出消除相的最佳曲线以斜率K和2.303相乘，得Ke值；
4. T1/2 = 0.693/Ke；
5. Tmax (达峰浓度时间)和Cmax(峰浓度)用实测值；
6. 总清除率：CL/F = D/AUC0→€ (D为给药剂量)；
7. 分布容积：Vd/F = (CL/F/ke)
8. 相对生物利用度：F = AUC0→60,试验制剂/AUC0→60,参比制剂 (%)或F = AUC0→€ ,试验制剂/ AUC0→€ ,参比制剂 (%)，采用各个受试者的AUC分别计算出各自的生物利用度F值，然后计算全部受试者F值的均数和标准差。
（二）、生物等效性评价
对受试制剂与参比制剂的生物等效性评价，应从药物吸收程度和吸收速度两方面进行。药代动力学参数AUC和Cmax，经对数转换后进行交叉试验的方差分析与双单侧t检验处理。若受试制剂AUC的90%可信限落在参比制剂80~125％范围内，Cmax的90％可信限落在70~143％范围内，Tmax经非参数法检验无差异，可认定受试制剂与参比制剂生物等效。
提供的数据
分别提供每个受试者的血药时间、浓度原始数据和由之计算出的药物代谢动力学参数，同时还应提供药时曲线。
Cmax，Tmax，AUC，生物利用度；
其它药物代谢动力学参数：ke、T1/2、Vd等；
生物等效性的评价结论及过程。
资料整理和保存
1、资料保存于遗传药理学研究所。
2、 应归档的资料包括：
（1）受试者个人知情同意书；
（2）临床试验记录；
（3）色谱图；
（4）数据和统计学处理资料；
（5）科研记录本；
（6）其它关于试验的所有有关资料。
