时间分辨荧光免疫分析——原理与实践

【摘要】对时间分辨荧光免疫分析（Time-resolved Fluorescence Immunoassay,TRFIA）产生的背景作了简单的回顾。介绍了镧系离子螯合物荧光的发射机理、特点及其对TRFIA的影响，讨论了不同TRFIA模式的优缺点，提出了新配基设计的基本原则。最后对未来TRFIA的研究方向提出了自己的看法。

【关键词】时间分辨荧光免疫分析；螯合物荧光；配基设计；解离增强

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时间分辨荧光分析（TRFIA）是以稀土离子为标记物，特异性荧光为特征的，超灵敏度检测技术，是非放射性标记技术中的佼佼者。它不仅灵敏度极高，而且克服了酶标记物的不稳定；化学发光仅能一次发光，且易受环境干扰；电化学发光的非直接标记等缺点。是免疫学检测的最佳选择。

灵敏度高，测量范围广
　　原子标记稳定性强，试剂盒有效期一年
　　对被标记物的生物活性和结构无影响
　　多标记技术，一个测试，多个项目，减少系统误差　

波长分辨

标记离子的荧光激发光波长范围较宽，发射光谱峰范围窄，是类线光谱，有利于降低本底荧光强度，提高分辨率。

激发光和发射光之间有一个较大的Stokes位移，有利于排除特异荧光的干扰，增强测量的特异性。

时间分辨

标记离子螯合物产生的荧光强度高，寿命长，有利于消除样品及环境中荧光物质对检测结果的影响。

每一秒钟检测样品1000次，结果取平均值，有利于提高检测的准确性。

时间分辨荧光分析（TRFIA）的基本原理