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师兄精选:免疫组化菜鸟攻略(一)

丁香园

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免疫组化是一门比较传统的技术,国外杂志对此还很重视,今天师兄就先跟你们简单侃侃,侃的不好,勿喷哈。想从师兄这里了解更多前沿技术的同学,加我微信:shixiongcoming,记得备注申请理由哦。

基础知识

免疫组织化学( immunohistochemistry )又称免疫细胞化学( immunocytochemistry ),是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。点这里→ 阅读全文

免疫组化SABC法

SABC (Strept Avidin-Biotin Complex) 法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法,是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法:一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC(链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素)+ 辣根酶底物显色。目前常用的亲和素从链霉菌(streptomyces)培养物中提取,因此称为链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物技术(streptavidin biotin-peroxidase complex method,SABC法)。限于篇幅,详细的操作步骤,点这里→ 阅读全文

免疫组化 Elivison 二步法

EnVision 显色系统是将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体(即 EnVision)直接放大信号40-50倍,把传统的二抗、三抗分别孵育合为一次孵育。特点:敏感、省时、方便、背景低(避免了内源性生物素干扰)。限于篇幅,详细的操作步骤,点这里→阅读全文

细胞免疫荧光染色法

其实免疫组化与免疫荧光的原理都是一样的,唯一不同的是,只不过前者二抗用的是辣根酶标记,后者用的是荧光素标记的。又是篇幅问题,师兄举例的三种细胞免疫荧光染色的实验步骤,点这里→ 传送门

免疫组化各步骤中应注意事项

完美的免疫组化实验,需要不断地收集前人的经验,并不断的优化细节,才能屡战屡胜,点击→ 传送门

想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

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