组织化学与免疫组织化学染色的细胞标本取材
互联网
一、培养细胞
1.贴壁生长的细胞
在细胞培养接种前,把涂有黏附剂的小盖片放人培养板中,接种后的细胞自然爬在小盖片上生长。取材时,把小盖片用预热的磷酸盐缓冲液(PBS)轻轻冲洗、沥干后即可加入固定液。
2.悬浮生长的细胞
制备细胞浓度为2×105·6 细胞/ml悬液,取50~100ul,加入离心涂片机内,1000r/min离心2分钟,细胞即可均匀分布于已涂黏附剂的载玻片上。
3.印片法
主要应用于活组织标本检查和剖检标本取材。新鲜标本做一剖面,充分暴露病变区,将载玻片轻轻压于病变区,脱落的细胞 便黏附在玻片上。随后立即将载玻片浸入细胞固定液内5~10分钟,取出后自然干燥,低温保存备用。其优点是简便省时,细胞抗原保存较好;缺点是细胞分布不均匀,玻片上细胞有重叠,影响观察效果。
二、涂片法
临床穿刺获取含有细胞的液体(腹水,胸水和心包液)或气管、宫颈等分泌物可直接涂片,如果液体太多,可加入1-2ml Hanks液(或细胞培养液)轻轻混匀,500r/min离心5~10分钟,弃上清液,制成细胞悬液(2×106 细胞/ml),使用细胞离心涂片机或吸一滴于载玻片上,轻涂,干燥后固定。