担心文章被 argue？你的 ChIP 要过这一关

如何判断 ChIP 抗体是否结合目的蛋白，完美的完成了任务？ChIP 后进行 WB 检测就尤为重要了，检测报告能告诉我们 ChIP 实验结果究竟如何，WB 检测不合格文章可能被 argue 哦。

ChIP 实验报告怎么看？
我们以几个项目的检测报告为例给大家解释 ChIP 的实验结果。

项目编号：KC- 2018 -undefined*。这个项目是对小鼠的细胞进行组蛋白 ChIP，使用组蛋白特异性抗体，ChIP 后的 WB 检测结果是这样的：

首先，这是一个非常好的结果：
除 marker 外共有 9 个泳道，从左往右依次是生物学重复样品 NC- 1～ 样品 NC- 3，每个样品 3 个泳道，分别为：样品（Input），使用目的组蛋白特异性抗体进行 ChIP 富集的产物（IP），使用 IgG 进行 ChIP 富集的产物（IgG）。

Input：阳性对照样品（ChIP 实验前取部分样品作为阳性对照），在样品中可以检测到目的组蛋白的表达；
IP：用组蛋白特异性的抗体进行免疫沉淀（IP），对沉淀产物进行 WB 检测出现目的条带，说明免疫沉淀获得目的组蛋白；
IgG：使用无特异性的 IgG 代替特异性抗体进行免疫沉淀，作为空白对照，沉淀产物无目的条带，排除了其他因素（非特异结合）对 ChIP 实验的影响。

Input 首先证明样品确实表达了目的蛋白，然后，IP 样品与 IgG 样品比较可看出样品中的目的组蛋白通过抗体免疫沉淀，有明显的特异性富集，说明 ChIP 实验成功，此外，三个生物学重复都成功 ChIP，且结果一致。
（注：抗体重链条带为加入二抗孵育时，因二抗结合一抗、IgG 的重链而产生）

这样，ChIP-seq 就完成了最关键的一步，可以进行后续的建库、测序、分析、挖掘了。有了这张漂亮的 WB 检测结果图，绝对没人敢质疑你的 ChIP！

康测科技还做过哪些 ChIP 测序项目呢，随手一搜还真不少，我们一起来看吧。

转录因子 ChIP-seq 项目

1. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：真菌，抗体描述：Flag 标签抗体

2. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：人源细胞，抗体描述：转录因子特异性抗体

在这个 WB 检测中，还检测了 IP 上清，IP 上清也就是免疫沉淀后的上层清液，IP 上清中有非目的蛋白，也可能有未被抗体结合的目的蛋白。通过 WB 检测，我们可以看出目的蛋白是否完全被结合、沉淀，是否需要增加抗体的量以提高免疫沉淀效果。从这张 WB 检测结果图中可知，样品中的目的蛋白被完全沉淀，上清中无目的蛋白。

3. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：人源细胞，抗体描述：转录因子特异性抗体

4. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：人源细胞，抗体描述：转录因子特异性抗体

5. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：微生物，抗体描述： Flag 抗体

组蛋白 ChIP-seq 项目

6. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：小鼠细胞，抗体描述：组蛋白特异性抗体

7. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：植物组织，抗体描述：组蛋白特异性抗体

8. 项目编号：KC- 2018 -undefined*，样品描述：植物组织，抗体描述：组蛋白特异性抗体