打破 CAR-T 疗法僵局！过表达 c-JUN 可缓解 T 细胞耗竭，增强 CAR-T 抗肿瘤疗效，并产生实体瘤治疗效果
嵌合抗原受体 T 细胞免疫疗法（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy, CAR-T），是近年来发展迅速的细胞治疗技术，可特异性识别肿瘤相关抗原，使效应 T 细胞具有更高的靶向性、杀伤性和持久性，并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境，并打破宿主免疫耐受状态。
虽然 CAR-T 在实体瘤中疗效不佳，但在肿瘤治疗领域仍具广泛前景。然而，因 T 细胞耗竭导致 CAR-T 细胞功能障碍，严重地阻碍了 CAR-T 治疗的进展。
2019 年 12 月 4 日，美国斯坦福大学医学院 Crystal L. Mackall 研究团队在 Nature 杂志发表题为《c-Jun overexpression in CAR-T cells induces exhaustion resistance》的研究论文，创新性发现，c-Jun 的功能缺陷介导耗竭的 T 细胞功能障碍，而过表达 c-Jun 的 CAR-T 细胞显著对抗 T 细胞衰竭，有效解决了这一新兴治疗方式当前面临的最主要障碍，为 CAR-T 疗法更广阔的临床应用提供新思路。
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主要内容
HA- 28z CAR 诱导 T 细胞耗竭
研究人员发现，CARs 与 14 g2a-E101K scFv 结合（HA- 28z CAR-T），呈现更严重 T 细胞耗竭特征，如降低的培养扩张性，增加的抑制性受体表达，增强的效应分化，削弱的 IFNγ 表达并显著抑制 IL- 2 产生。
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随后，研究人员利用 Single-cell RNA-seq 和 ATAC-seq 技术，确证 HA- 28z CAR-T 模型较好地模拟了人类 T 细胞耗竭情况。
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接下来，研究人员发现，AP- 1 转录因子基序染色质的可及性增加，bZIP 和 IRF 转录因子过表达也与衰竭 T 细胞功能障碍有关。
过表达 c-Jun 阻止 CAR-T 细胞耗竭
研究人员发现，CAR-T 细胞过表达 AP- 1 后，产生大量 IL- 2，而该过程由 c-Jun 介导，而非 c-Fos。
随后，研究团队构建过表达 c-Jun 的 JUN-P2A-CAR bi-cistronic 质粒，其能增强 c-Jun N 端的磷酸化（JNP）。
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相比于对照组，过表达 c-Jun 可显著抑制抗原刺激后产生的 IL- 2 和 IFNγ释放，并在单细胞水平增强 CAR-T 细胞功能。
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研究团队利用 ATAC-seq 和 RNA-seq 技术探究过表达 c-Jun 抗 T 细胞衰竭的机制
过表达 c-Jun 并不在表观遗传学水平产生影响，而显著地改变转录组基因表达，其中，过表达 c-Jun 显著改变 319 个基因表达，其中包括降低 T 细胞耗竭基因及增强记忆基因。
随后，研究人员实验发现，冗余的 AP- 1 -IRF 复合体促进 T 细胞耗竭进程，而过表达 c-Jun 可减少或替换染色质中 AP- 1 复合物对抗该进程。
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过表达 c-Jun 增强 CAR-T 细胞抗肿瘤作用，且增强对实体瘤疗效
Nalm6 -GD2 +白血病模型中，研究人员发现 JUN-HA- 28z CAR-T 细胞可增强抗肿瘤作用。同时，体外实验证实，JUN-CD22 -BBz CAR-T 细胞显著提升炎症因子的产生，并增强其抗肿瘤活性。
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CAR-T 疗法因其对实体瘤疗效不佳，而临床应用范围受限，研究团队发现，过表达 c-Jun 增强 CAR-T 细胞靶向实体瘤的能力，为 CAR-T 的临床治疗提供新思路。
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延伸阅读
Crystal L. Mackall 博士是儿科学和医学教授，同时也是斯坦福大学癌症研究所的斯坦福癌症研究所副主任，斯坦福大学细胞与基因医学实验室的联合医学主任。此外，Mackall 担任小儿癌症免疫治疗计划负责人。
图片来源：斯坦福大学官网截图
自 1998 年以来，Mackall 领导了一项前沿的临床转化研究计划，致力于开发针对儿童癌症的新的免疫的疗法。
Mackall 发现 IL- 7 在 T 细胞稳态中的重要作用，并引领了新型免疫修复剂重组人白细胞介素 7 的临床开发。
此外，还进行了肿瘤疫苗，免疫调节剂，实验性骨髓移植和基于细胞疗法的儿童癌症治疗转化研究。
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小结
近年来，CAR-T 细胞免疫疗法发展非常迅速，可经基因改造技术, 显著增强效应 T 细胞的靶向性、杀伤活性和持久性，并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境，打破宿主免疫耐受状态，在肿瘤临床治疗中展示了巨大的应用潜力和发展前景。
然而，因 T 细胞耗竭，往往限制 CAR-T 的疗效和应用，而 Crystal L. Mackall 研究团队创新性地发现，过表达 c-Jun 可显著抑制 T 细胞耗竭，增强 CAR-T 疗效。
同时，过表达 c-Jun 亦解决了 CAR-T 细胞对实体瘤疗效不佳的窘境，为临床肿瘤治疗提供新思路和新方向。
