原代细胞接种和培养

基质胶，类器官培养基，移液器，CO₂ 培养箱

1、将细胞悬液与基质胶按照一定的比例充分混匀，通常基质胶的使用浓度 ＞70%（本步骤操作应在冰上进行，避免基质胶凝固）。用预冷的枪头吸取 50 μl 含基质胶的细胞悬液，接种至 37℃ 预热的培养皿中，避免产生气泡。

2、将接种完细胞的培养皿放入 CO₂ 培养箱内（37℃，5% 的 CO₂ 浓度）静置 2min，轻晃胶滴无明显流动后小心倒扣，待其充分凝固（约 10~15min）。待胶滴充分凝固后，向培养皿中加入适当体积的完全培养基，置于培养箱内（37℃，5% 的 CO₂ 浓度）培养。

3、接种后培养的细胞，需密切观察类器官的生长状况，每隔 3～5 天更换一次类器官培养基，一般情况下培养 4～10 天可得到类器官。