α 突触核蛋白原子力显微镜（AFM）实验操作步骤（适用于 tau, Aβ 等其他活性蛋白）

材料：过滤消毒的 dH₂O、新鲜切割的云母、0.1% 聚-L-赖氨酸、吸水纸、真空浓缩仪（Vacufuge）

仪器：原子力显微镜

此方法描述了一般 AFM 样品制备和成像。具体参数可能因成像的蛋白质样本及其缓冲液成分而异。

1. 1-5mg/mL 的蛋白质样品在过滤消毒的 dH₂O 的中稀释 1/10 至 1/100 然后将 20uL 滴到新鲜切割的云母上（12mm，V1）。样品在室温下孵育 10-20 分钟。

注：有些样品不容易粘在云母上；在这种情况下，用 0.1% 聚-L-赖氨酸预处理新鲜切割的云母，用过滤消毒的 dH₂O 洗涤，并在添加样品前干燥。

2.将 100uL 过滤消毒的 dH₂O 添加到表面并使用干净的吸水纸吸走，以洗去盐分。总共重复 2-5 次。

3.使用真空浓缩仪（Vacufuge）在室温下真空干燥云母上的洗涤样品 5-10 分钟，直到所有液体蒸发。

4.然后在 AFM 仪器上使用 ACSTA 针尖在轻敲模式下对样品进行成像，自由振幅为 500mV，Z 控制器设定值为 55%。