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BMDC 提取与培养需要注意的事项?

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材料与仪器

BMDC 细胞

步骤

BMDC 的培养注意事项:

1. 小鼠品系和性别:目前培养 BMDC 用的比较多的小鼠是雌性或雄性 C57BL/6 小鼠。

2. 单独使用 GM-CSF 还是联合使用 IL-4?
GM-CSF+IL-4 联合诱导的 BMDC 的成熟度高于 GM-CSF 单独诱导的 BMDC。

3. 成熟诱导剂的选择:
LPS 和 CD40L 均是 DC 体外完全成熟的强诱导剂,CD40L 诱导成熟的 BMDC 在体内显示出最强的免疫调节能力,最好能用重组的 CD40L 三聚体蛋白来刺激 DC;用 LPS 刺激 DC 完全成熟所用的浓度一般为 1-10 g/ml。

4. 培养方法的选择:
最常用的三种 BMDC 培养方法,Inaba 经典法和 Lutz 法和 son 法,根据需要选择。

来源:丁香实验

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