合作专家 | 黄玥琳博士
生理学 大连医科大学
原理
蔗糖偏好实验是基于小鼠对甜味偏好这一特点,给予小鼠一瓶蔗糖溶液,一瓶水,供小鼠选择,比较小鼠对蔗糖溶液和水的行为偏好。
用途
蔗糖偏好实验用于调查实验室啮齿动物的无快感(即无法感觉愉悦),尤其是在基于压力的抑郁症模型中,可类比抑郁症患者“在这世界中,我感觉不到快乐”,抑郁小鼠对于蔗糖的摄取要明显小于正常小鼠。
材料与仪器
一瓶蔗糖溶液,一瓶水。
步骤
1. 在进行实验前,将小鼠单独饲养,适应环境一周。
2. 准备蔗糖溶液与水:
a、向 50 毫升离心管注入约 40 毫升水,并盖上吸管盖。
b、倒置管子,使吸管中的气泡上升。
c、倒置时,确保水管线低于锥形端。
d、给每根管子贴上标签(例如,永久性标记中的「A」和「B」),并使用永久性标记标记水线的位置。
e、或者,可以记录初始瓶子重量。
f、将 2 个倒置的管子放入笼子金属盖中,尽量不要摇晃,以避免滴落。
g、两个瓶子都应该放在分开的金属架的一侧,另一侧放食物。
h、确保橡胶塞与锁紧装置齐平,钢吸管延伸至金属笼盖下方。
i、 把食物放在铁丝盖的另一边。
3. 连续 4 天每天评估基线耗水量。为了评估耗水量,称量瓶子或标记体积水平。
a、如果进行重量测量,记录消耗前和消耗后管子的重量(1 g=1 ml 水)。
b、对于体积测量,使用永久性标记记录管上的体积水平。
c、建议每天使用不同颜色的标记。
d、标记体积时,不要倒置管子(吸管盖垂直)。
e、监测液体流动是否存在任何问题,并观察吸管下方是否有溢出迹象,例如湿垫料。
f、每天切换管子的位置(左对右)。通过计算小鼠对蔗糖偏爱度 % =糖水消耗量 / ( 糖水消耗量 + 纯水消耗量) × 100% ,以此表示小鼠对蔗糖的偏好程度。
图片引自:Eagle, A. L., Mazei-Robison, M. and Robison, A. J. (2016). Sucrose Preference Test to Measure Stress-induced Anhedonia. Bio-protocol 6(11): e1822. DOI: 10.21769/BioProtoc.1822.
注意事项
1.每天切换蔗糖溶液与水的位置,防止因位置固定导致小鼠偏好结果不准。
2.整个实验过程中要将实验条件固定,防止因外部条件导致的实验结果不准确。
常见问题
1.该实验中,小鼠的垫料不宜过多,小鼠在筑巢时或有压力时会把垫料堆起来,垫料接触吸管会导致吸管内的内容物流失,使得水或蔗糖溶液体积不准确。
2.蔗糖的浓度应该怎么确定?
答:如果实验者的假设结果表明偏好可能减少,则建议更高的浓度。然而,如果实验者预计偏好会增加,那么较低的浓度可能更合适。
来源:丁香实验