简介
外泌体是直径约为 30~200 nm，密度在 1.13~1.21 g/mL 的小囊泡。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳等，外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体 （也称为多囊泡体） 的膜性囊泡。
透射电子显微镜 （Transmission Electron Microscope, TEM） 是利用高能电子束充当照明光源而进行放大成像的大型显微分析设备，可以观察 nm 级细微结构，分辨率可达到 0.2 nm。通过透射电镜我们可以清楚直观的看到外泌体的典型结构。
（透射电镜）
用途
直观表征外泌体的形态结构、大小等。
材料与仪器
材料：碳支持膜、外泌体样本、2% 醋酸双氧铀溶液、超纯水
试验器材及仪器：1.5 或 0.5 ml EP 管、白枪头、移液器、涡旋振荡器、掌上离心机、超净工作台、自锁镊子、透射电镜（80 kV）
步骤
1. 将提供的外泌体样本从 -80 ℃ 冰箱从取出后置放于冰盒中，溶解后振荡混匀离心。
2. 根据样本情况，将样本调整至合适浓度或粘度。
3. 使用移液枪吸取 15 ul 左右的外泌体样本于铜网上静置 1 min。用镊子夹铜网要轻，防止铜网夹破。
4. 使用滤纸将铜网上的外泌体样本吸干，然后使用移液枪吸取 15 ul 左右的 2% 醋酸双氧铀染色液室温染色 1 min。若铜网可见较明显吸附物，可用纯水滴加表面，快速吸去，反复几次清洗。
5. 使用滤纸将铜网上的外泌体样本吸干，将染色完成的样本风干。
6. 观察拍照，保存图片。
注意事项
1. 夹取碳支持膜时不能破坏碳膜，影响制样及后续观察。
2. 样本浓度或粘度不宜过高，影响制样及后续观察。
3. 注意防护，染料可能对人体具有潜在的危害性。
常见问题
如果视野中的背景太厚，无法观察外泌体结构：
1. 稀释样本至适当浓度；杂蛋白较多，建议纯化外泌体后再制样观察 未吸附到任何东西：
2. 可能该样本不含外泌体结构；对碳支持膜进行亲水化处理，增加碳膜的吸附以及吸附的均匀程度
来源：丁香实验
