简介
在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。 通过花粉活力的测定,可以了解花粉的可育性,并掌握不育花粉的形态和生理特征。掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
原理
花粉萌发测定法测花粉活力的基本原理是正常的成熟花粉具有较强的活力,在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。
材料与仪器
器材:载玻片、显微镜、玻璃棒、恒温箱、培养皿、滤纸、载玻片与盖玻片、镊子、棕色试剂瓶、烧杯、量筒、天平。
试剂:
① 葫芦科植物、水稻、小麦等花粉。
② 培养基:称量 10 g 蔗糖、1 mg 硼酸、0.5 g 琼脂与 90 mL 水放入烧杯中,在 100 ℃ 水浴中熔化,冷却后加水至 100 mL 备用。
步骤
花粉萌发测定法测花粉活力的基本过程可分为如下几步:
A. 将培养基熔化后,用玻璃棒蘸少许,涂布在载玻片上,放入垫有湿润试纸的培养皿中,保湿备用。
B. 采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,在 25 ℃ 左右的恒温箱(或室温 20 ℃ 条件)中孵育,5~10 min 后在显微镜下检查 5 个视野,统计其萌发率。
注意事项
1. 花粉萌发测定法中不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植 物种类而改变培养条件。
2. 不是所有植物的花粉都能在本实验介绍的培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。其他植物花粉萌发培养基可查阅有关实验指导。
来源:丁香实验