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实验76 花粉活力的测定

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18046

 

实验76 花粉活力的测定

 

  通过花粉活力的测定,可以了解花粉的可育性,并掌握不育花粉的形态、生理特征。

 

Ⅰ.碘—碘化钾染色测定法

 

原理

 

  水稻正常花粉呈圆球形,并积累淀粉较多,通常可用I—KI染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形,不积累淀粉,用I—KI染色,不呈蓝色,而呈黄褐色。

 

仪器药品

 

  显微镜   镊子

  恒温箱   载玻片、  盖玻片

  I—KI溶液:取KI2g溶于5─10ml蒸馏水中,然后加入1g I2 ,待全部溶解后,再加蒸馏水至300ml。贮于棕色瓶中备用。

 

操作步骤

 

  1.花粉采集:取充分成熟将要开花的花朵带回室内。

  2.镜检:取一花药置载玻片上,加1滴蒸馏水,用镊子充分捣碎后,再加1─2滴I—KI溶液,盖上盖玻片,置低倍显微镜下观察。

  凡被染色成蓝色的为活力较强的花粉粒,呈黄褐色的发育不良的花粉粒。

 

Ⅱ.过氧化物酶测定法

 

原理

 

  具有生活力的花粉含有活跃的过氧化物酶。此酶能利用过氧化氢使各种多酚及芳香族胺发生氧化而产生颜色,依据颜色可知花粉有无活性。

 

仪器药品

 

  显微镜    载玻片

  盖玻片    镊子

  1.0.5%联苯胺:将0.5g联苯胺溶于100ml50%乙醇中。

  2.0.5%α-萘酚:将0.5gα-萘酚溶于100ml50%乙醇中。

  3.0.25%碳酸钠:将0.25g碳酸钠溶于100ml蒸馏水中。

  4.0.3%过氧化氢。

  试验前将溶液1、2、3各10ml混合均匀成试剂I;溶液4为试剂II。

 

操作步骤

 

  1.在干洁载玻片上放少量花粉,然后加试剂I和II各1滴,搅匀后盖上盖玻片。30℃下经10分钟后在低倍显微镜下观察,如花粉粒为红色,则表示有过氧化物酶存在,花粉有活力,能发芽;如无色或黄色,则表示已失去活力,不能发芽。

  2.观察2─3个制片,每片取5个视野,统计100粒,并计算其发芽率。

 

Ⅲ.氯化三苯四氮唑法(TTC法)

 

原理

 

  见实验71种子发芽率的快速测定中的TTC法。

 

仪器药品

 

  显微镜     镊子

  载玻片、   盖玻片   0.5%TTC溶液(参阅实验71)

 

操作步骤

 

  1.取少数花粉于载玻乍上,加1─2滴TTC溶液,盖上盖玻片。

  2.将制片于35℃恒温箱中放置15分钟。然后置于低倍显微镜下观察。凡被染为红色的活力强,淡红的次之,无色者为没有活力的花粉或不育花粉。

  3.观察2─3个制片,每片取5个视野,统计100粒,然后计算花粉的活力百分率。

 

 

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