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花粉活力与柱头可授性检测

相关实验:花粉活力与柱头可授性检测

最新修订时间:

简介

传粉过程始于花药开裂和成熟花粉的散出,携带着雄配子或其前体的花粉粒被暴露在干燥条件下,必须在具有活力时到达适宜的接受柱头才能完成传粉过程,具有接受花粉的适宜柱头的花朵即处于柱头可授粉期。花粉保持活力的时间长短和柱头可授粉期的长短组合在一起,深刻影响着植物的传粉成功率,特别是异花传粉的植物。因此,对植物花粉活力与柱头可授性的研究,可为人工杂交育种提供重要的理论指导。

材料与仪器

器材:

盛花期的拟南芥。

器具:

① 显微镜

② 载玻片

③ 凹面载玻片

④ 盖玻片

⑤ 直头细镊子

⑥ 解剖针

⑦ 滤纸

⑧ 平皿(60 mm)

试剂:

① 蒸馏水

② 氯化三苯基四氮唑

③ 蔗糖

④ 联苯胺

⑤ 过氧化氢

步骤

花粉活力与柱头可授性检测的基本过程可分为如下几步:

(一)花粉活力检测

花粉活力检测采用TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)法。利用 0.5%TTC 蔗糖溶液使有生活力的花粉变成红色,而使丧失生活力或者败育的花粉不显红色来测定花粉生活力。具体方法是:将散出不同时间的花粉撒在载玻片上,滴加含 0.5% TTC 的蔗糖溶液,迅速盖上盖玻片,置入内有湿滤纸的平皿中,连同平皿放置在 37 ℃ 黑暗条件下 2 h。统计盖玻片中央部位 3~5 个视野中红色花粉所占的比例,随机选取 6 朵小花进行测定,计算平均值。

数据采用 Excel 进行处理,采用 SPSS 进行显著性分析,然后将实验结果以图表的形呈现。

(二)柱头可授性检测

用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性。在盛花期,每天中午采开花后不同天数的花朵,将其柱头放入凹面载玻片中,滴加联苯胺-过氧化氢反应液(1% 联苯胺:3% 过氧化氢:水 = 4:11:22,体积比),盖上盖玻片,迅速置显微镜下观察。若柱头具可授性,则柱头周围的反应液呈现蓝色并有大量气泡出现。通过比较气泡量的多少和大小可以衡量柱头可授性的强弱。

数据处分析后将实验结果以图表的形式呈现,参考表 32-1。

表 32-1 柱头可授性检测结果

开花时期

时间/h

人工异株授粉法结实率/%

联苯胺-过氧化氢法可授性

开花前

48

-

+

24

-

+

开花后

1

22.5

+

12

20.0

++

24

36.7

++

48

38.7

++

72

26.3

++

96

13.8

+

120

-

+/-

资料来源:黄修梅等,2008。

注:“+”表示柱头具有可授性;“++”表示柱头具有强可授性:“+/-”表示部分柱头具有可授性,部分柱头不具有可授性。

来源:丁香实验

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