碘-碘化钾染色测定花粉活力

在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中，常涉及花粉活力的鉴定。 通过花粉活力的测定，可以了解花粉的可育性，并掌握不育花粉的形态和生理特征。掌握花粉活力快速测定的方法，是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。

碘-碘化钾染色测定花粉活力的基本原理是多数植物正常的成熟花粉粒呈球形，积累较多的淀粉。I₂-KI 溶液可将其染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形，往往不含淀粉或积累淀粉较少，I₂-KI 溶液染色呈黄褐色。因此，可用 I₂-KI 溶液染色来测定花粉活力。

器材：

① 载玻片

② 显微镜

③ 玻璃棒

④ 恒温箱

⑤ 培养皿

⑥ 滤纸

⑦ 载玻片与盖玻片

⑧ 镊子

⑨ 棕色试剂瓶

⑩ 烧杯

⑪ 量筒

⑫ 天平

试剂：

① 葫芦科植物、水稻、小麦等花粉。

② 培养基：称量 10 g 蔗糖、1 mg 硼酸、0.5 g 琼脂与 90 mL 水放入烧杯中，在 100 ℃ 水浴中熔化，冷却后加水至 100 mL 备用。

③ I₂-KI 溶液：取 2 g KI 溶于 5~10 mL 蒸馏水中，加入 1 g I₂ 待完全溶解后，再加蒸馏水 300 mL。贮于棕色瓶中备用。

红墨水染色法测定种子生活力的基本过程可分为如下几步：

A. 采集水稻、小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药，取一花药于载玻片上。

B. 加 1 滴蒸馏水，用镊子将花药捣碎，使花粉粒释放。

C. 再加 1~2 滴 I₂-KI 溶液，盖上盖玻片，在显微镜下观察。

D. 凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒，呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。 观察 2~3 张片子，每片取 5 个视野，统计花粉的染色率，以染色率表示花粉的育性。

碘-碘化钾染色法测定花粉活力不能准确表示花粉的活力，也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。因为三核期退化的花粉已有淀粉积累，遇碘呈蓝色反应。另外，含有淀粉而被杀死的花粉粒遇 I₂-KI 也呈蓝色。