简介
在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。 通过花粉活力的测定,可以了解花粉的可育性,并掌握不育花粉的形态和生理特征。掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
原理
氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定花粉活力的基本原理是具有活力的花粉呼吸作用较强,其产生的 NADH2 或 NADPH2,可将无色的TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)还原成红色的 TTF(三苯基甲臜)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收 TTC 后的颜色变化判断花粉的生活力。
材料与仪器
步骤
氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定花粉活力的基本过程可分为如下几步:
A 采集植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上。
B 加 1~2 滴 0.5% TTC 溶液,搅匀后盖上盖玻片,置 35 ℃ 恒温箱中。
C 10~15 min 后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红色次之,无色者为没有活力或不育花粉。观察 2~3 张片子,每片取 5 个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
来源:丁香实验