朊粒病的动物接种实验和细胞接种实验

动物接种实验用于判断感染因子的传染性， 致病性， 目前仍然是检查 TSEs 传染性和致病性的金标准。这种方法是将通过倍比稀释的感染因子接种易感动物， 观察实验动物的发病情况。

动物接种实验的基本原理是通常采用转基因技术将人或动物 PrP 基因转入小鼠， 使其表达宿主的 PrP 蛋白， 进而产生对 CJD 或牛海绵状脑病的易感性。

器材：转基因小鼠

朊粒病的动物接种实验和细胞接种实验有以下几个实验步骤：

动物接种实验用于判断感染因子的传染性、致病性， 目前仍然是检查 TSEs 传染性和致病性的金标准。这种方法是将通过倍比稀释的感染因子接种易感动物， 观察实验动物的发病情况。可通过终点滴定法或潜伏期法来评估其感染性 （用平均潜伏期与接种剂量曲线来计算）。由于人或动物 TSEs 在野生型小鼠不能引起 PP^＊ 沉积， 目前通常采用转基因技术将人或动物 PrP 基因转入小鼠， 使其表达宿主的 PrP 蛋白， 进而产生对 CJD 或牛海绵状脑病的易感性。将人或动物 PrP 接种此类转基因小鼠， 其囊状树突样细胞可出现 PrP 聚集，30 天后， 在小鼠脾脏中即可检测到感染性 P，P～蛋白， 为人类 TSEs 感染性的生物学检测提供了敏感、可靠的方法。目前， 针对多种已知的肮粒病， 已建立了感染动物模型。其中， 大鼠、小鼠。 仓鼠。 田鼠及转基因鼠对肮粒比较敏感， 常作为实验动物模型。动物接种具有结果可靠、说服力强的优点， 但由于受到实验费用、实验时间、种间屏障、标本病变情况﹑接种剂量、接种次数以及肮粒毒株、潜伏期等多种因素影响， 动物接种实验成功率差异较大， 且不适用于快速检测。

与动物实验相比， 细胞接种实验因实验费用低， 耗时短， 重复性高等优势， 作为快速诊断依据， 更容易被多数实验室接受。目前常用于玩粒体外增殖的细胞， 主要是一些起源于神经组织的细胞系， 如鼠嗜铬细胞瘤细胞 (PC12) 鼠神经母细胞瘤细胞 (N2a) 等。感染细胞可以采用蛋白酶抵抗试验， 动物试验来检测。但是由于尚未建立起理想的体外 Pr 繁殖体系，运今为止细胞实验仍未广泛用于肮粒病研究和诊断。