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低压低氧构建肺动脉高压动物模型

相关实验:肺动脉高压动物模型建模实验

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简介

低氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)和肺血管重建是低氧性肺动脉高压最主要的病理生理特征。


低压低氧构建肺动脉高压动物模型能够全自动地模拟低压低氧性肺动脉高压,在整个缺氧过程中舱内氧浓度始终维持在 10% 左右,舱内空气干燥,温度与室温基本一致,重要的是,在缺氧开始阶段和结束阶段由于有缓冲舱,使低压低氧舱中的压力能够平稳下降和上升,并且大鼠在低氧过程中的死亡率几乎为零。能准确、方便地复制低压低氧性肺动脉高压模型,稳定性好,整个低氧过程中做到了完全自动化、省时省力。

原理

低压低氧构建肺动脉高压动物模型的基本原理是低氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)和肺血管重建是低氧性肺动脉高压最主要的病理生理特征。慢性低氧使肺血管发生 HPV,而 HPV 反复持续出现时,促进肺血管重建,造成右心室肥厚,而这是一个恶性循环的过程。


慢性低氧或间断性低氧都可使动物肺动脉异常重建,从而引起肺动脉高压甚至肺衰竭。高原肺动脉高压的可能发病机制为起始刺激因子(如低氧低压等)引起肺血管重建,肺动脉中膜增厚,肺血管阻力增高,从而导致肺动脉压升高和右心室衰竭。

材料与仪器

器材:


① 低氧舱;


② RM-6200 四导生理记录仪;


③ 手术工具;


④ Wistar 大鼠等。


试剂:

① 10% 乌拉坦。

步骤

低压低氧构建肺动脉高压动物模型的基本过程可分为如下几步:

A. 健康 Wistar 大鼠置于低氧舱中,舱内按每只大鼠放钠石灰 5 g,然后抽气减压,速度为 3 kPa/min 减至 51~54 kPa(1 kPa=7.5 mmHg)为止,此时氧含量为 10%~10.5%,每天如此低氧持续 6 小时,共 2~4 周。

B. 动物在最后一次缺氧实验完成后次日,用 10% 乌拉坦(1 mL/100 g)腹腔麻醉。

C. 测定右心室压和肺动脉压力:分离大鼠右侧颈外静脉,将塑料导管(外径 0.9 mm,内径 0.6 mm)一端连接压力传感器,一端从颈外静脉插入,用 RM-6200 四导生理记录仪观察压力波形,以辨别导管顶端在右心室及肺动脉位置。测定并记录平均右心室压力和平均肺动脉压力。

D. 测毕结扎右侧颈外静脉,并立即分离左侧颈总动脉,将塑料导管(外径 1 mm,内径 0.6 mm)一端与注射针头连接,针头尾端接三通管开关,后者接注射器,便于用肝素生理盐水冲洗导管以防凝血,另一端从颈总动脉插入。转动三通阀门,使导管与注射器相通,当有回血时,关闭三通阀门。将大鼠置于密闭舱内,舱内气体浓度条件同前。

E. 30 分钟后,抽取导管部分的血液弃掉。用注射器抽取动脉血做血气分析。将大鼠从舱内取出,立即剪开动物胸腔,取出心、肺制备病理标本。

来源:丁香实验

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