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异体移植模型

相关实验:子宫内膜异位症动物模型

最新修订时间:

简介

异体移植模型是根据将人的子宫内膜或异位组织移植到免疫缺陷动物体内产生的子宫内膜异位症模型。

用途

由于移植的子宫内膜来源于人, 在阐述 EMs 确切机制及检测药物对 EMs 有效性方面更具说服力,可用于研究 EMs 的病因、药物试验及激素调节等。

材料与仪器

试剂:

冷 PBS。

实验动物:

免疫缺陷鼠 (突变系小鼠),包括裸鼠、SCID 鼠、NOD/SCID 鼠等。

步骤

异体移植模型的基本过程可分为如下几步:

A. 动物常用。动物为免疫缺陷鼠 (突变系小鼠),包括裸鼠、SCID 鼠、NOD/SCID 鼠等。根据实验周期选择不同种类小鼠。一般选用裸鼠,实验不应超过 4 周,实验周期 3 周以上宜选用 SCID 鼠或 NOD/SCID 鼠。

B. 方法 ① 内膜准备:人子宫内膜组织标本常来源于腹腔镜下确诊子宫内膜异位症并行子宫切除术的患者,患者术前 6 个月未接受过激素类药物治疗。子宫切除后立即无菌刮取子宫内膜,用冷 PBS 反复漂洗,剪成 3 mm × 3 mm x 3 mm 碎块,置入无菌 DMEM 培养基或 PBS 中保存. 取材后 1 小时内接种。术后病理检查应为正常分泌期子宫内膜。

② 内膜移植:将免疫缺陷鼠 (如裸鼠) 腹部皮肤切开一 0.5 cm 切口,将子宫内膜碎块埋植入皮下,缝合皮肤。术后每天观察裸鼠伤口及生活情况,每周检查皮下种植部位 3 次,观察皮下结节的生长情况。此法也可将子宫内膜碎块移植到裸鼠盆腹腔内。

注意事项

A. 移植物在不同种类小鼠中完好保存的时间窗不同,裸鼠中异位内膜组织 3 周成活率为 33%~66%,形态保存良好,但从第 9 天开始,腺体细胞趋于扁平,腺腔扩张囊泡化;NOD/SCID 鼠中移植物 4 周后仍有 37% 存活,无腺体细胞腺腔形态改变,雌激素受体 (estrogenreceptor,ER) 和孕激素受体 (progesterone receptor,PR) 保存时间比在裸鼠中长。如将分散的人子宫内膜细胞注射到去势 NOD/SCID/γcnull(NOG 鼠)肾包膜下,激素补充组 10 周后移植物仍 100% 成活。

B. 该模型种植物的光镜和超微结构均与原组织相同,是很好的 EMs 动物模型,但免疫缺陷鼠饲养条件高,不能耐受多次手术采血检测,且由于其免疫缺陷原因,不能用来研究病灶引起的机体免疫方面的改变,也不适于研究环境因素及长期药效反应。

来源:丁香实验

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