简介
自体移植模型是根据动物模型的制作主要基于子宫内膜异位症的种植学说及其病理改变。临床上内膜异位的部位多见于卵巢、子宫骶韧带、子宫下段后壁浆膜层以及覆盖子宫直肠陷窝、乙状结肠的盆腔腹膜等处, 尤以卵巢最为常见。通过手术方式将自体子宫组织块或子宫内膜块移植到这些部位 (相当于人体异位内膜的常见部位) 即可诱导模型发生。
用途
自体移植模型是研究 EMs 免疫炎症机制及治疗的良好模型。子宫内膜块自体移植法常用于研究子宫内膜异位症的药物疗效和治疗机制，而子宫块自体移植法可用于研究子宫内膜致不孕的发生机制。根据研究目的可采用不同的实验动物。家兔模型可用于研究 EMs 对排卵、卵子运输、黄体溶解和种植后流产等的影响。大鼠为全年多发情动物, 性周期短 (4～5 天), 变化规律, 可用于研究 EMs 对妊娠、排卵、粘连形成、黄体功能缺陷及自身免疫的影响, 还可研究药物或其他因素对 EMs 的作用。
材料与仪器
试剂：
① 青霉素或庆大霉素；
② 雌二醇。
实验动物：兔、大鼠、小鼠等。
步骤
自体移植模型的基本过程可分为如下几步：
A. 动物选择与准备
(1) 兔：一般选用成熟雌兔 (新西兰大白兔或家兔)，实验前每天做阴道涂片进行细胞学检查，只有那些连续表现出 4 个以上周期，每周期持续 4-5 天发情期的兔方可用于实验。
(2) 大鼠：-般选用 8～12 周、180 - 300 g 且动情周期规律的 SD 或 Wistar 大鼠。
(3) 小鼠：一般选用 6～10 周、20 - 30 g 动情周期规律的未孕雌鼠，多用 BALB/c、C57BL、Swiss 等品系。
B. 将兔仰卧于手术台上，腹部剃毛消毒，3% 戊巴比妥钠按 1 ml/kg 耳缘静脉注射麻醉 [鼠可用 10% 水合氯醛 (3 m/kg) 或 1% 戊巴比安钠 (40 mg/kg) 或 20% 乌拉坦 (15 g/kg) 腹腔麻醉]。麻醉成功后无菌条件下于下腹中线作 2～3 cm 切口 (鼠 1.5 em 左右) 进人腹腔，然后按下列手术过程进行自体移植。
C. 手术过程
（1）子宫组织块自体移植法：切除一侧子宫角远端 2 cm，残端用 4-0 羊肠线缝合。切下的子宫角放入37 ℃ 培养液中，去除多余的脂肪，将子宫角沿纵轴切断，然后剪成 1～23 mm』的组织块，将这些组织块用 4-0 尼龙线缝于腹腔各处，如肠系膜、子宫卵巢筋膜等处，使组织块的子宫浆膜面直接与腹膜的表面对合，而子宫内膜面朝向腹腔。所有的肠系膜移植物缝于系膜血管附近，而子宫卵巢移植固定于卵巢筋膜的脂肪垫上，生理盐水冲洗腹腔以减少手术引起的粘连。
（2）子宫内膜块自体移植法: 切除一侧宫角置于培养液中，沿纵轴切开，迅速将子宫内膜从子宫肌层剥离，并剪成 5 mm × 5 mm 左右的小块，内膜块用 4-0 尼龙线缝于自体腹膜上 (如卵巢包膜输卵管、子宫系膜、肠系膜及腹壁的各部)。
D. 术后处理造模术后可用青霉素或庆大霉素通过腹腔注射或肌内注射预防感染。局部皮肤碘伏消毒，2 次/天，连续 3 天，常规饲养。手术后可给予雌激素处理以利于移植内膜生长。小鼠术后第 1 天开始肌注雌二醇每只 0.02 ml，连续 3 天；大鼠术后第 2 天开始肌注雌二醇 0.1 mg/(kundefinedd)，每隔 4 天 1 次，共 3 次。通过补充雌二醇，EMs 成功率可达 90% 以上。
E. 移植内膜的观察可在术后 3～4 周将雌性鼠与雄性鼠交配，以研究子宫内膜异位症对生殖力的影响。模型是否成功一般在造模后 1 个月通过病理组织学检查 (如移植内膜的重量及组织形态学改变、周围组织粘连情况等) 证实，这种方法需要再次手术或处死动物，不利于动态观察。
近年，有人将表达绿色荧光蛋白 (green fluorescent protein，CFP) 的转基因鼠子宫内膜碎片注射到去势野生型 C57/B36 雌鼠腹腔，荧光显微镜下，绿色移植物定位更准确，组织学上与宿主辨别更精确，大小和质量与荧光强度呈正相关。但 CFP 发射光谱组织穿透性差，腹内病灶监测无皮下病灶监测可靠，且腺病毒感染的细胞 3 周后荧光衰减，GFP 病灶和药物间相互作用亦无法研究。无论是感染携带 GFP 基因的腺病毒的人子宫内膜还是转基因 CFP 鼠组织，都需要开腹观察腹内病灶。
此后，Becker 等创立的荧光酶模型解决了 GFP 模型的侵人性问题。将荧光酶等位基因和泛素 C 启动子结合建立纯合型转基因鼠，将其子宫内膜移植到同系基因型鼠或 NOD/SCID 鼠，腹腔注射荧光素监测异位组织生长，尾静脉注射荧光素监测异位组织的血管发生。此外，最近有研究者采用磁共振 (MRI) 技术非侵人性动态监测大鼠异位组织体积、血流灌注及对激素的反应性获得成功。
注意事项
子宫内膜块的自体移植法较少发生粘连、生殖道变形及闭塞等病理改变。而子宫块的自体移植法常
引起不同程度的粘连。
来源：丁香实验
