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血清学法对MHC II类分子分型

相关实验:MHC分型实验

最新修订时间:

原理

MHC II 类分子分型的基本原理是指从外周血中分离到纯的 B 细胞,而后通过加入已知 MHC 抗血清(先用血小板吸收去除其中的抗 MHC I 类分子的抗体),孵育后加入染料染色,通过抗原和抗体的特异性反应,从而对 MHC II 类分子进行分型的方法。

材料与仪器

器材:

倒置显微镜。

试剂:

① 外周血,纯的 B 细胞;
② 用血小板处理后的 MHC 抗血清;
③ 补体;
④ 荧光染料。

步骤

MHC II 类分子分型的基本过程可分为如下几步:

① 取外周血,分离 PBMC,进一步分出纯的 B 细胞。

② 将已知 MHC 抗血清与血小板孵育,去除其中的抗 MHC I 类分子的抗体,而后向 B 细胞中加入上述 MHC 抗血清,20 ℃ 孵育 60 分钟后,加入补体,37 ℃ 孵育 60 分钟。

③ 加入染料,在倒置显微镜下观察结果,细胞着色则为阳性,表示待检 B 表面具有已知抗血清所针对的抗原。

来源:丁香实验

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