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乳鼠试验

相关实验:药品生物制品成品检定常用动物实验

最新修订时间:

简介

乳鼠试验是指使用小鼠尚未离乳幼鼠进行的一类动物试验。

原理

乳鼠试验的基本原理是乳鼠因其机体发育尚未完善,被广泛应用于病原体致病性和毒理学等实验中,特别在药品检验检定和相关科研中,乳鼠试验是一个重要的实验类别。

材料与仪器

器材:

① KM 或 NIH 等远交系小鼠;

② 标准饲养盒。

步骤

乳鼠试验的基本过程可分为如下几步:

A. 动物选择。

乳鼠试验除特殊规定外,一般使用 KM 或 NIH 等远交系小鼠,远交系小鼠群基因容量大,繁殖能力和母鼠哺育能力均强于近交系,离乳率一般在 80% 以上。头胎和年轻母鼠的食子和母性不强比较常见,6 胎以后的母鼠因哺育能力下降一般予以淘汰。

注意事项:

① 遗传因素会影响母鼠的杀子行为或乳鼠存活率,实验小鼠不同品系之间的杀子频率不同,通过许多突变系、基因敲除和转基因小鼠观察到一些与母鼠杀子或养育后代能力有关的基因。

② 动物在试验前需要适应动物实验室环境,如果使用 1 ~5 日龄的乳鼠试验,订购动物时直接要求 1~5 日龄的乳鼠,会使乳鼠和母鼠没有足够的适应时间,应订购怀孕一定时间的孕鼠,使其能在动物实验环境适应至少 1 周时间。

B. 动物运输。

动物运输时,不应使用一次性纸质运输盒, 应使用母鼠一直居住的标准饲养盒,运输时不应更换垫料,标准饲养外罩较大的运输盒。动物进入实验室后,不应更换垫料并继续使用该标准饲养盒直到实验结束。

注意事项:母鼠有做幼仔养育窝的习性,使用运输盒运输,将意味着对母鼠在孕期精心准备的(交配 4 天后到生产前一天共约 15 天)哺育窝的破坏,幼仔出生后 2~3 周内是变温的、缺乏体温调节能力,所以养育窝对于成功养育幼仔非常重要。

C. 适应时间。

乳鼠试验涉及母鼠和乳鼠,试验操作时正处于乳鼠生理功能不完善期和母鼠心理敏感期,延长适应时间使动物充分适应新环境就显得尤为重要。特别是直接订购乳鼠的情况下,母鼠和乳鼠正因运输、笼盒变化、环境变化等刺激处于应激状态,再加上实验操作的刺激,母鼠母性能力减弱和乳鼠的反应能力减弱,导致乳鼠死亡率增加。

注意事项:对于啮齿动物,如果供应商提供的资料能确定引|进动物的健康状况,生产繁殖环境和动物实验环境相似,运输过程中采取了与病原体隔离的措施,可不用适应。

D. 实验环境和试验操作。

紧张会导致母鼠忽视、杀死或吃掉自己的后代。听觉干扰、换窝操作、人员频繁走动等刺激因素可引|起母鼠紧张。试验操作也应尽可能减小对动物的干扰,如噪声、异味、照度频繁变化等。所以,乳鼠试验最好使用专门的实验室,实验人员和管理人员应接受专门的培训。

E. 内环境丰富。

提高动物饲养环境丰富度对动物福利和实验准确性的正面意义在国外已获得广泛共识,实验动物管理者普遍已将环境丰富纳入到动物的日常管理中。一般小鼠饲养盒内除垫料外没有其他物品,对于怀孕期或哺乳期的母鼠来说,没有做窝材料使其做窝的天性受到抑制,没有庇护所使其更易受到人类活动的惊扰;对于初生乳鼠来说,没有温暖的哺育窝,爬出同窝兄妹的集中区后如得不到母亲的照顾,会生病并可能死亡。做窝材料应该无毒性、不能弓|起动物损伤、蓬松、轻而易于搬运,一般选用干草、碎纸、纸条和卫生纸等材料。

F. 换窝动物实验。

日常饲养管理中,实验小鼠在满足国家标准规定居住空间条件下,一般每周换窝 1~2 次,但是对于母鼠带乳鼠的笼盒,有研究表明换窝过频会影响乳鼠的存活率。在实验室环境下,人类在房间里移动可以看作是小鼠潜在的掠食者,特别是当清洁笼具时对母鼠和幼仔的直接操作,对窝和做窝点的干扰可能减少幼仔存活的机会。考虑到乳鼠实验中一般一窝动物居于一个标准盒, 粪尿并不多, 换窝频率可定为每 2~3 周一次,换窝时不换饲养盒,保持哺育窝的完整 (不换)。

来源:丁香实验

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