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肺移植术

相关实验:单器官移植术

最新修订时间:

简介

肺移植术是用手术方法将同种异体的健康肺植入体内以取代丧失功能的病肺。手术中需要作肺动脉、肺静脉及气管的吻合。

材料与仪器

器材:

不同型号丝线、手术显微镜、显微手术器材、气管插管、呼吸器、舌钳

试剂:

①阿托品
②氯胺酮
③肝素
④林格液
⑤生理盐水
⑥青霉素
⑧2.5% 硫喷妥钠
⑨链霉素

步骤

(一)犬肺移植术


A. 术前准备:


选择健康同种犬作为供、受体,受体体重略大于供体,性别不限。术前禁食12-48 小时。术前30 分钟肌内注射阿托品0.5-1mg。准备好呼吸器和插管。


B. 供体手术:


a. 用2.5% 硫喷妥钠溶液按25 mg/kg 缓慢推注麻醉后,行气管插管连接呼吸器,用正压控制呼吸。继续用硫喷妥钠静脉滴注维持麻醉。


b. 取右侧卧位于手术台上,左侧向上,固定四肢,后外侧胸背部手术区去毛、消毒、铺无菌巾,取后外侧切口,经第4 肋间进胸,切断或切除1-2 根肋骨,清晰暴露左胸腔,切断所有左肺韧带,游离左肺,用无损伤性血管钳或血管夹阻夹左肺动、静脉和支气管。


c. 动脉于左肺动脉根部切断,静脉于三支肺静脉连接的左心房处切断。


d. 因静脉有上、中、下肺静脉三支汇合于左心房,因此可钳夹左心房代替肺静脉,切除和吻合部分左心房代替左肺静脉切除和吻合。


e. 支气管于近叶支气管分叉处钳夹切断。


f. 切断左肺动脉、左心房和左支气管后,取出左肺于4 ℃预冷的林格液中,用含有肝素(25 U/ml) 的林格液自左肺动脉进行肺灌洗,直至移植肺完全由粉红变苍白,至左心房流出液呈无色透明为止。


g. 灌洗的同时用纯氧间歇吹张左肺,用无损伤钳钳夹左总支气管、左肺动脉和部分左心房,置入4 ℃林格液中备用。

C. 受体手术:


a. 麻醉、体位、备皮、消毒、切口进入胸腔切除左肺方法同供体。


b. 在切除左肺时,尽可能保留足够长度的动脉、支气管,以利于吻合。


c. 供体肺与受体之间的吻合顺序依次为左心房-左肺动脉-左总支气管。


d. 左心房用3/0 丝线全层外翻缝合后加全层间断缝合;左肺动脉用5/0 丝线连续缝合;左总支气管用丝线端端间断缝合,并以胸膜缝盖。


e. 依气管-左心房-肺动脉顺序去钳夹,移植肺即刻色泽由白渐变为粉红色,随呼吸器频率而呼吸。


f. 此时检查,若移植肺血管充盈饱满,吻合口无漏血,气管不漏气,即可关胸。术毕于左下胸腔放引流管一根。


D. 术后护理:


单笼饲养观察。麻醉清醒后动物可自由饮水、进采食。术后注意保温,可肌内注射行霉素、链霉素1 周,预防感染,根据实验目的决定是否用免疫抑制剂。


(二)大鼠肺移植术


A. 术前准备:选择成年健康的近交系大鼠作为供受体。供、受体体重相近或受体略大于供体,雌雄不限。术前禁食12 小时,自由饮水。供、受体术前均肌内注射阿托品0.25 mg 准备好显微外科器械,包括手术显微镜等器械、专用呼吸器和气管插管等。


B. 供体手术:


a. 以氯胺酮150 mg/kg 腹腔注射麻醉大鼠,呈头高尾低仰卧位于手术台,让大鼠颈部呈过伸位,用舌钳向外上方牵拉舌部,用手术灯作局部照射光源,即清晰可见声门开口。


b. 用气管插管经声门插入气管,连接呼吸器。呼吸器参数:呼吸频率100 次/分,潮气量3-4 ml。


c. 固定四肢和头部。胸腹部去毛、消毒。


d. 腹正中切口,切开腹壁,剪开隔肌,自两侧胸壁剪开,移去前胸壁,离断左肺下韧带。


e. 自尾静脉或阴茎背静脉注射1000 U 肝素,剥离左肺门,游离左肺动、静脉和支气管,以3/0 丝线于远端结扎主支气管。


f. 结扎时,使肺处于半膨隆状态。切开肺动脉干,用4 ℃含肝素3 U/ml 的林格液3-5 ml缓慢(约1 分钟)低压灌洗。同时剪开肺静脉,灌注至移植肺完全变色。


g. 自肺静脉流出液呈无色透明后,将支气管和肺动、静脉尽可能地远离左肺切断,剪除周围连接组织,取出左肺浸泡于含肛素的林格液中,修剪肺、动静脉,并分别套管(套管技术见下述)再冲洗动、静脉,检查是否通畅后待移植。
C. 套管技术:套管由管体、管尾组成。套管体长1 mm,尾长1 mm,肺动脉套管内径1.1 mm,肺静脉套管内径1.5 mm。套管体刻有一凹槽,以便丝线结扎固定尾部。将血管自套管腔内穿过,将血管翻于套管上,以5/0 丝线结扎固定,然后将套管套人受体血管内,以5/0 丝线结扎固定,从而完成血管吻合。

D. 受体技术:


a. 麻醉、插管,连接呼吸器同供体。将大鼠取右侧卧位于手术台上,左侧胸部去毛、消毒。


b. 于第4肋间斜切口,切开胸壁进胸,进胸后自尾静脉或阴茎背静脉注入生理盐水或林格液1.0-1.5 ml, 以棉签拨开左肺,暴露左肺下韧带,切断。


c. 牵左肺于胸腔外,此时可用7号线将切口两侧各缝吊一针,牵开固定、拉大切口,充分显露术野。


d. 分离左肺周围组织,暴露肺门,游离左肺动、静脉和左主支气管,以3/0 丝线尽量靠近近端结扎左支气管,靠远端切断。


e. 游离动、静脉干净后,分别靠近端以血管夹夹闭动、静脉,远端切断。以含肝素液冲洗供肺和受体动、静脉残端。


f. 以上述血管套管技术吻合动、静脉先静脉、后动脉。套好后依次开放静脉、动脉,可见移植肺由白色变红色,血管充盈呈暗红色。


g. 最后吻合支气管、用于支气管的套管长度和制法同血管套管,内径约1.9 mm, 将受体的主支气管断端翻转至套管上并以5/0 丝线固定。


h. 移植肺逐渐扩张,由红色变为粉红色。如发现未完全扩张,即加大潮气量,使移植肺完全扩张后,还纳入胸腔。


i. 检合3个吻合口有无出血和潮气,用干净生理盐水冲洗并蘸干胸腔后,在下胸腔留置引流管,关闭胸腔。


j. 动物麻醉清醒后,拔除胸腔引流管,逐渐减少潮气量。动物恢复自主呼吸时,脱机观察,自主呼吸频率100 次/分左右时,即可拔管。动物放入观察室继续观察。


E. 术后护理:单笼饲养,自由进食和饮水。观察室温维持在22 ℃左右。术后3天内肌内注射青霉素预防感染。

来源:丁香实验

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