小肠移植术

尖刀、剪刀、血管夹、肠钳、胆道镜、手术显微镜

显微手术器械

（一）猪小肠移植术

A. 术前准备：

术前30分钟肌内注射阿托品0.5 mg. 氯胺酮20 mg/kg, 麻醉后呈仰卧位，固定四肢于手术台上，腹部手术区域去毛，消毒，铺巾，静脉滴注0.25% 硫喷妥钠维持术中麻醉，供体、受体方法相同。

B. 供体手术：

a. 取腹部正中切口，按层次切开腹壁、腹膜进入腹腔，暴露小肠、找到并分离出肠系膜上动脉、肠系膜静脉，根据移植需要在不同位置切断肠系膜上动脉、肠系膜上静脉。

b．作节段性小肠移植的在结肠动脉远端切断肠系膜上动脉、肠系膜上静脉。作全小肠移植的在肠系膜上动脉、肠系膜上静脉起始部切断。

c. 继而切取肠管（全小肠或节段小肠），将切取的小肠自肠系膜上动脉插管，灌洗4 ℃乳酸林格液，灌洗压力为7.8-9.8 kPa, 灌洗至肠壁发白，从肠系膜上静脉流出的液体澄清为止，肠腔以4 ℃的0.5% 甲硝唑溶液(100-200 ml) 灌洗后，将切下来的小肠置入4 ℃乳酸林格液中保存待移植。

C. 受体手术：

a. 麻醉、备皮、消毒和固定同供体操作。取腹部正中切口，按层次切开腹壁、腹膜进入腹腔，暴露小肠。

b．分别用血管夹和肠钳阻断并切断受体的肠系膜上动脉、肠系膜上静脉及其供应区的小肠（节段性或全小肠）。

c. 全小肠移植时，需于肠系膜上动脉、肠系膜上静脉起始部切断肠系膜上动脉、肠系膜上静脉及其所供血的小肠，保留近端空肠和末端回肠，然后将保存在林格液中的供肠取出，并置于受体腹腔切口处，将供肠的肠系膜上动脉、肠系膜上静脉与受体切断的肠系膜上动脉、肠系膜上静脉行端端吻合。

原位小肠移植将供体小肠空肠端和回肠端与受体保留的空肠端和回肠端作端端吻合，在移植小肠近端造口插管固定于腹壁外。节段性小肠异位移植时，将移植肠的肠系膜上动脉、肠系膜上静脉与受体的肠系膜上动脉、肠系膜上静脉吻合。

D. 术后护理：

术后动物要单独饲养在观察室内，术后禁食3-5 天，术中可作颈静脉插管，从颈部皮下作隧道从颈背部穿出接输液器，术后禁食期间由插管内给予补液、营养以及抗排斥反应药物等，同时静脉输注头孢唑啉钠和甲硝唑抗生素。

全小肠移植禁食时间长，必要时应用全静脉营养液。一般术后7 天，如移植肠黏膜色泽且常，可认为手术成功。肠黏膜色泽观察可通过节段性移植肠腹壁造口和全小肠移植肠近端腹壁插管，造口内借助胆道镜观察。

（二）大鼠小肠移植术

A. 术前准备：选择成年健康纯种大鼠，性别不限。受体体重可略重于供体，术前禁食12-24小时，自由饮水。准备手术显微镜、显微手术器械。

B. 供体手术：

a. 用乙醚吸入或氯胺酮腹腔注射麻醉大鼠后，仰卧位四肢固定在手术板上，腹部消毒。

b．取腹部正中切门进入腹腔，将小肠翻向腹腔外一侧，用湿盐水纱布敷盖，结扎回盲部血管和结肠中动、静脉，小心分离肠系膜上动、静脉以及门静脉，尽量剥清附着在肠系膜上静脉和门静脉上的胰腺组织，结扎静脉分支。

c. 分别于十二指肠空肠曲与末端回肠处切断小肠，用4 ℃，0.5% 新霉素或0.2% 阿米卡星液冲洗肠腔，用手轻柔挤尽肠内残留液体。

d. 分离并结扎腹主动脉段的近心端，以40 ml/h的速度于远心端插管灌注4 ℃含25 U/ml 肝素的乳酸林格液。

e. 在脾静脉和肠系膜上静脉根部汇合的门静脉处切断，当灌洗液从肠系膜上静脉门静脉段流出变清亮和移植小肠苍白时，迅速于肠系膜上动脉根部（连同一段腹主动脉）切取肠系膜上动脉腹主动脉段，切断联系移植小肠的其他组织，取出移植物置于4 ℃平衡液中保存，修整待用。

C. 受体手术：

a. 麻醉、备皮、固定，切口和进腹腔操作程序同供体手术。

b．切除全部小肠，仅留十二指肠空肠曲远端、回盲瓣近端各1-2 cm肠管，以便和移植肠吻合。

c. 在肾动脉水平以下分离出腹主动脉及后腔静脉，按照移植肠修整后的肠系膜上动脉腹主动脉段和肠系膜上静脉门静脉段管口口径，在显露的腹主动脉和后腔静脉壁上准备吻合口。

d. 将修整好的移植肠从保存液中取出置于切口侧，行移植肠的肠系膜上动脉腹主动脉段和受体的腹主动脉端侧吻合，移植肠的肠系膜上静脉门静脉段与受体的后腔静脉行端侧吻合，均用8/0 或9/0 丝线缝合。

e. 放开阻断动、静脉血管夹，立即见移植肠红润，然后行移植肠的空肠端和回肠端与受体的剩余空肠、回肠行端端吻合，用7/0 丝线缝合。

f. 用生理盐水冲洗腹腔、肠管，检查吻合口无出血后关闭腹腔。也可在关闭腹腔前留置6 ml 平衡液于腹腔内，以维持术后水、电解质平衡。

（三）小鼠小肠移植术

A. 术前准备：选用体重23-27 g 成年健康雄性BALB/c小鼠作为供、受体。禁食6-l2小时，自由饮水。

B. 于麻醉前15分钟供、受体小鼠均皮下注射阿托品0.04 mg/kg, 受体鼠肌内注射头孢唑林40 mg/kg，使用4% 水合氯醛7.5 ml/kg 腹腔注射麻醉。

C. 供体手术：

a. 正中切口，入腹后仔细自胰腺中游离出肠系膜上静脉——门静脉，沿腹主动脉分离肠系膜上动脉。

b． 在空肠十二指肠交界处切断肠管，保留空肠远端2 cm，自近端插管向远端低压灌注肠腔冲洗液1 ml（冲洗液由每升甲硝唑中加入960OOOU庆大霉素配成），以清洁肠道。

c. 自腹主动脉下端开口并插管，于肠系膜上动脉与腹腔动脉间阻断腹上动脉血流，立即使用4 ℃血管灌洗液0.2-0.4 m1 (每升乳酸钠林格液含25000U肝素）通过肠系胶上动脉进行灌洗，于肝门部切断门静脉，使灌洗液自门静脉断端流出，小肠及其系膜转为乳白色，切取包括腹主动脉一—肠系膜上动脉和门静脉的供体小肠，置4 ℃乳酸钠林格液中保存。

d. 修整肠系膜上动脉腹主动脉袖和门静脉，前者长度1-2 mm，后者长度4-5 mm。

D. 受体手术：

a. 开腹后将自体肠管置f于左侧腹腔，游离后腔静脉及腹主动脉，上至左肾静脉，下达腹主动脉分叉水平，并结扎切断此间的血管，用显微止血钳上下同时阻断腹主动脉及后腔静脉。

按照静脉吻合口略上，动脉吻合口稍下的原则，在腹主动脉及后腔静脉侧壁均剪开长径分别为供体动、静脉断端直径1.5倍的椭圆形开口，一般为1.5 mm，开口上、下端与移植小肠腹主动脉袖及门静脉断端各作一牵引线(11/0 尼龙线）。

b．继续作后壁至前壁的连续缝合，以完成移植小肠腹主动脉袖与受体腹主动脉、移植小肠门静脉与受体后腔静脉的端侧吻合，松开钳夹，供体肠管迅速红润，并可见肠系膜血管搏动。

c. 继续将移植肠段作近、远端皮肤造口，关闭腹腔，皮下注射生理盐水1.5 ml。

D. 术后护理：术后24 小时内继续将小鼠置于灯下保温、并维持室温在26-28 ℃，同时每隔12 小时皮下注射肝素25 U，共两次。

在术后96小时中，每隔12 小时肌内注射头孢唑林40 mg/kg，小鼠完全清醒后，可饲以5% 葡萄糖生理盐水及常规饲料。以术后清醒，自由进食、进水，成活4天以上为存活标准。

2. 血管吻合是手术中的关键技术，在吻合肠系膜上动脉、肠系膜下静脉时要防止血管内膜内翻，防止漏血和血栓。

3. 猪的血管较粗，吻合肠系膜上动脉、肠系膜上静脉时，一般不需借助手术显微镜即可完成吻合，常用6/0丝线作间断缝合，动脉吻合口缝8-10 针，静脉吻合口缝10-12 针。血管再通后有漏血处可补缝1-2 针。

4. 小鼠的小肠移柏方法大体上同大鼠小肠移植。由于小鼠个体小，血管细，血容量少，移植手术能否成功，关键在于血管吻合技术和在手术中减少出血量。