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阿米巴动物模型

相关实验:寄生虫病动物模型

别名:Animal models of parasitic diseases,animal models of entamoeba histolytica

最新修订时间:

简介

阿米巴原虫由于生活环境不同, 可分为内阿米巴和自由生活阿米巴, 前者寄生于人和动物, 后者生活在水和泥土中, 偶尔侵入动物机体。现已知内阿米巴属的溶组织内阿米巴会引发阿米巴痢疾和肝脓肿; 而自由生活阿米巴的耐格里属和棘阿米巴属主要引起脑膜脑炎、角膜炎、口腔感染和皮肤损伤。

原理

阿米巴动物模型的基本原理是营养状态, 遗传、年龄。 体重, 免疫等因素影响阿米巴的易感性。经仓鼠肝脏传递或在培养时加入胆固醇或铁, 可促使其毒力恢复。盲肠接种引起的病变所需的滋养体数在 (2-5)× 106 , 溶液的体积以不造成肠近扩张为度。

眼局部免疫细胞可抑制棘阿米巴角膜炎的形成, 而激素可降低免疫细胞的免疫作用, 从而有利于棘阿米巴角膜炎的形成。

用途

溶组织内阿米巴原虫用于用滋养体接种 SCID 小鼠盲肠, 未发现肠道病变, 表明宿主肠道对感染有抵抗力, 并不依赖于以淋巴细胞为基础的免疫力, 决定其易感性的因素可能是巨噬细胞, 粒细胞, 补体和自然杀伤细胞以及黏液, 肠道菌群、渗透压, 肠细胞表面受体等未知的微环境因素。

棘阿米巴角膜炎用于建立棘阿米巴原虫角膜炎动物模型, 不仅可深入研究该病的致病机制及生理病理特征, 而且可以验证药物的治疗作用、筛选有效的抗棘阿米巴原虫新药以及进行角膜移植研究等。

材料与仪器

器材:家兔

试剂:地塞米松

步骤

阿米巴动物模型的基本过程可分为如下几步:

(一) 溶组织内阿米巴原虫


A. 肓肠内接种法: 将计数的滋养体混悬液直接接种于盲肠, 诱发肠道病变。根据病变程度分级, 此法应用最多, 手术简单, 感染率高, 病变较局限, 且易于取材观察。

B. 密闭盲肠祥内接种: 将动物麻醉后解剖, 游离结扎盲肠, 成为密闭的脾肠祥, 后用生理盐水冲洗脾肠内容物, 接种后 24~48 小时,75% 的动物产生脾肠壁溃疡, 本法周期短。 病变重, 但手术复杂, 多用于急性试验。

C. 肝内注射: 将一定数量滋养体注人肝脏, 数天后可见肝内脓肿。

(二)棘阿米巴角膜炎


A. 因此, 实验前 3 天在家兔结膜下注入地塞米松, 同时应用激素点眼, 然后将棘阿米巴原虫的滋养体和包囊悬液注入兔角膜基质内, 可以成功建立家兔棘阿米巴角膜炎动物模型。

注意事项

1. 用纯培养的滋养体接种 SCID 小鼠的肝脏或门脉, 可形成阿米巴肝脓肿, 并可从脓肿内分离出滋养体。用该模型观察到用重组溶组织内阿米巴抗原免疫的沙鼠对阿米巴肝脓肿有保护作用。腹腔接种则不能引起定位性或播散性病变。

2. 棘阿米巴角膜炎模型具有建模快。 技术简便, 易于操作等优点, 是进行棘阿米巴角膜炎实验研究的一个重要工具。

来源:丁香实验

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