合作专家 | 李子涵博士
肿瘤免疫 中山大学
简介
利用电刺激大鼠海马区建立复杂部分性癫痫动物模型。
用途
是目前被公认为研究脑兴奋性、可塑性及长时程增强最实用的模型,哺乳类动物均可建立该类模型,广泛用于抗癫痫药物的药效研究。
材料与仪器
动物:200~300 g 大鼠,雌雄皆可。
试剂:
1% 戊巴比妥
器材:
① 常用手术器械
② 立体定向仪
③ 缝合线
步骤
1、大鼠麻醉后固定于立体定向仪上。
2、进行常规消毒操作后,根据大鼠海马 CA 1 区坐标,冠状缝后 3.8 mm,中线旁 2.0 mm,双侧颅骨钻孔,用立体定向仪将尖端裸露的直径 0.5 mm 的漆包线所制的电极置入双侧海马 CA 1 区,并用牙科水泥妥善固定,也可选择双侧杏仁核团。
3、术后经 7 天恢复期后,通过所置入的电极每日给予电刺激,参数为双向方波,波宽 1 mm,频率 50~60 Hz, 强度 0.2~1.0 mA,刺激持续 2~6 s。
4、刺激数日后可观测到对该刺激反应的后放电,随着刺激天数的增加,后放电逐渐延长并复杂化,直至出现癫痫样放电并伴癫痫发作。
5、刺激 30~50 天,这种痫样放电及癫痫发作开始稳定,说明动物已被点燃,以后不予刺激也有自发性癫痫发作。
注意事项
手术器械用前必须严格消毒灭菌,防止手术感染,手术创口尽可能小;颅骨钻孔注意深浅,一旦感到突破感立即停止,防止大量出血。
来源:丁香实验