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饲养层细胞(feeder)制备

相关实验:大鼠ES细胞技术

最新修订时间:

简介

胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)是指从桑椹胚或附植前囊胚内细胞团分离的一种多能性干细胞,是最经典的多能性干细胞,它位于个体发育的顶端,具有发育的全能性,能够分化为组成机体的所有类型的细胞,进而形成机体的任何组织和器官,并具发育成完整个体的能力。

材料与仪器

器材:

① 无菌手术器械
② 显微镜
③ 注射器
③ 培养箱、培养皿

试剂:

① 鼠
② trypsin/EDTA
③ MEF 培养基培养液
④ PBS、麻醉剂、以 70% 乙醇等

步骤

饲养层细胞制备的基本过程为:

1. 取复苏冻存的 MEFs 滋养层细胞,用小鼠成纤维细胞培养液按 4 x 10/c㎡ 的密度均匀接种于 6 孔培养皿中,置于 37 ℃,5% CO2 培养箱中培养过夜培养;

2. 次日更换为大鼠胚胎干细胞培养液,放入培养箱中备用。

来源:丁香实验

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