简介
胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)是指从桑椹胚或附植前囊胚内细胞团分离的一种多能性干细胞,是最经典的多能性干细胞,它位于个体发育的顶端,具有发育的全能性,能够分化为组成机体的所有类型的细胞,进而形成机体的任何组织和器官,并具发育成完整个体的能力。
材料与仪器
器材:
① 无菌手术器械
② 显微镜
③ 注射器
③ 培养箱、培养皿
试剂:
① 鼠
② trypsin/EDTA
③ MEF 培养基培养液
④ PBS、麻醉剂、以 70% 乙醇等
步骤
饲养层细胞制备的基本过程为:
1. 取复苏冻存的 MEFs 滋养层细胞,用小鼠成纤维细胞培养液按 4 x 10/c㎡ 的密度均匀接种于 6 孔培养皿中,置于 37 ℃,5% CO2 培养箱中培养过夜培养;
2. 次日更换为大鼠胚胎干细胞培养液,放入培养箱中备用。
来源:丁香实验