简介
悬浮细胞样本的制备-粘附法，是免疫细胞荧光染色步骤之一。
原理
悬浮细胞样本的制备-粘附法的基本原理是使用化学黏附剂将悬浮细胞黏附于玻片上，常用黏附剂为多聚赖氨酸，通过其侧链粘连在固相支持物上，带正电荷的多聚赖氨酸与总体上带负电荷的细胞结合。
材料与仪器
器材：载玻片、盖玻片或组织培养皿、离心机。
试剂：
① 蒸馏水配制1 mg/ml 多聚赖氨酸溶液 ;
② PBS
步骤
悬浮细胞样本的制备-粘附法的基本过程可分为如下几步：
A. 用蒸馏水配制 1 mg/ml 多聚赖氨酸溶液，配制后不能长期存放，应每周新配一次。
B. 在干净的载玻片、盖玻片或组织培养皿上滴加多聚赖氨酸，静置 10 分钟。
C. 冲洗玻片或培养皿数次，放于支架上，空气干燥，然后室温保存。
D. 400 g 离心 5 分钟，洗涤细胞，并重悬细胞于 PBS 中，重复一次。
E. 重悬细胞于 PBS 中，调整浓度至 1x105/ml，滴加至固相支持物上，室温下静置 10 分钟。
F. 细胞可进行固定。
注意事项
过度黏附，此时细胞形态会严重扭曲，影响对亚细胞结构的观察，应降低黏附剂浓度。
来源：丁香实验
