简介
目前常用的细胞因子生物学测定法包括促进细胞增殖和增殖抑制法、细胞毒活性测定法、抗病毒活性测定法、集落形成法、趋化作用测定法及细胞因子诱导产物测定法等。这些方法比较耗时耗力，所以它主要用来评价细胞因子的功能和活性，而不是进行常规细胞因子检测的手段。
原理
生物学活性检测法是根据某些细胞因子特定的生物学效应，应用相应的指示系统和标准品来反映待测标本中某种细胞因子的活性水平，一般以活性单位来表示。M1 细胞是一种小鼠髓样白血病细胞系，在无 IL-6 的条件下培养时可迅速增殖：而在有 IL-6 的条件下培养时，则可向巨噬细胞分化，并伴随有增殖水平的明显下降，利用 M1 细胞在 IL-6 刺激下细胞增殖出现抑制作用的特点，将其用于 IL-6 生物学活性的检测。
用途
细胞因子生物学测定可用于测定多种细胞因子检测法，下面以 M1 细胞系检测 IL-6 生物学活性为例，介绍细胞因子生物学活性测定方法。白细胞介素 -6 (interleukin6,IL-6) 是参与免疫调节的重要细胞因子，又称杂交瘤细胞生长因子，因此 IL-6 的生物学活性常用其依赖的杂交瘤细胞系作为指示细胞进行检测。除了增殖试验测定 IL-6 生物学活性外，还可用增殖抑制法测定其生物学活性。
材料与仪器
器材：9999 型玻璃纤维滤纸，96 孔平底培养板，多头细胞收集仪，CO2 孵箱，β液闪计数仪。
试剂：
① M1 细胞系；
② 10% FCS-RPMl 1640；
③ 3H-TdR；
④ IL-6 标准品；
⑤ PPO、POPO、二甲苯。
步骤
生物学测定法检测可溶性细胞因子，以 M1 细胞系检测 IL-6 生物学活性为例其基本过程可分为如下几步：
A. 用 10% FCS-RPMI 1640 调整 M1 细胞数 (2-3)x104 ml-1。
B. 96 孔平底培养板中每孔加 1OOμl M1 细胞悬液，每孔细胞数 (2-3)x103。
C. 加入不同稀释度标准 IL-6 和待检样品 (每孔 100μl)。
D. 37℃ , 5% CO2 孵箱培养 48-56 h。
E. 每孔加入 O.5μCi(5Oμl) 3H-TdR, 继续培养 12 h。
F. 用多头细胞收集仪收集于玻璃纤维滤纸。
G. 烤干后，β 液闪仪上测定 cpm 值。
计算以降低 M, 细胞最大增殖水平的半数值所用 IL-6 的浓度为 1 个生物学活性单位。
注意事项
1. M1 细胞最好用 DMEM 培养基培养, 也可用 10% FCS - 1640 培养基培养，但此培养基 IL-6 含量不易过高，以免影响其生长；
2. 避免同位素污染；
3. 加样品时，应从低浓度到高浓度顺序加。
来源：丁香实验
