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裂隙灯显微镜检测眼部疾病

相关实验:眼部疾病表型分析实验

最新修订时间:

简介

裂隙灯显微镜的基本结构由双目立体显微镜、裂隙灯、滑台、头靠、工作台(或底座)五大部件组成。

原理

裂隙灯显微镜检测眼部疾病的基本原理是将具有高亮度的裂隙形强光(裂隙光带),持一定角度照入眼的被检部位,从而获得活体透明组织的光学切面;通过双目立体显微镜进行观察,就可看清被检组织的细节。裂隙灯显微镜被广泛应用于临床眼科检测眼前段包括角膜,虹膜和晶状体的畸形。通过裂隙灯显微镜可以清楚地观察小鼠眼是否突出、有无出血,眼睑有无闭合,角膜是否浑浊和血管化,虹膜是否正常有无色素沉着,瞳孔对光反应是否扩张,晶状体是否浑浊、有无与角膜粘连。可确定病变的位置、性质、大小及其深度。

材料与仪器

器材:裂隙灯显微镜、小鼠等。

步骤

裂隙灯显微镜检测眼部疾病的基本过程可分为如下几步:

A. 打开裂隙灯,将照射的光带调整至最大的宽度弥散光照状态,小心地从笼子里取出一只老鼠,在小鼠位置下面放垃圾袋以防小鼠尿液和粪便污染设备。

B. 一只手抓牢小鼠放到裂隙灯光束下,另一只手,操作操纵杆来回移动裂隙灯,前、后、左、右,直到眼睛处于光束下。

C. 初步检查小鼠眼睛是否突出、有无出血,眼睑有无闭合并拍照记录。

D. 拍摄晶状体正面,宽裂隙看晶状体前囊表面,裂隙宽不要超过瞳孔(太宽角膜有反光,避不开,影响拍摄清晰度),照明角度 20°左右,让角膜反光避开瞳孔,让瞳孔里的晶状体像清晰,亮度根据倍率(倍率大,亮度强)结合实际情况调节。

E. 调整光照强度,由暗变亮观察小鼠瞳孔是否扩张。

F. 切换到裂隙灯模式,操作操纵杆设置到 30°角,裂隙光从小鼠眼的一侧移动到另一侧,观察小鼠角膜和虹膜任何异常并拍照记录。用裂隙光拍摄晶状体,需要散瞳才能拍到清晰效果,将裂隙光照在瞳孔与虹膜边界处,利用视网膜反光看晶状体。

G. 将照明系统与观察系统清晰聚焦于同一观察部位,裂隙灯与显微镜成 45°角,观察角膜是否浑浊和血管化,虹膜是否正常有无色素沉着,晶状体是否浑浊,有无与角膜粘连。

结果示例如图 8-12-1 所示。

注意事项

1. 如果仪器是打开的而没有缝隙光,应检查裂隙光是否打开,旋钮是否处于正确的位置。

2. 显微镜目镜镜头因长期使用而染上灰尘油污。先用胶皮喷头吹去尘土,再用镜头纸将其擦拭干净,若仍有油污,可蘸无水乙醇擦洗。

3. 裂隙像有毛刺或位置不在圆形光阑的中央。一般裂隙和调节用的手轮是装在一起的。要排除这两种故障就必须将这部分整体拆下,裂隙像有毛刺,一般是裂隙片上粘有脏物造成,清洗干净即可。清脏物时一定注意不能用镜头纸或带毛的棉花等,要用干净光滑的纸或专用擦树脂镜片、CD 盘的镜布来擦拭。若通过显微镜观察,裂隙缝不在中央,可以通过调节裂隙大小的螺旋同轴上的厚度大小不等位置来完成。


当裂隙成像在显微镜的上方或下方而不在中央时,可通过调整显微镜水平调整螺钉,使其裂隙缝呈现在显微镜屏幕中央。


4. 裂隙大小不能固定。裂隙是由两个平等刀片组成,两刀片间装有弹簧,其作用是使两刀片闭合。裂隙大小就是通过调节前面所说的夹在裂隙间的厚度不等的圆片来完成。对应厚度越厚,裂隙越宽,也就是说,除了最薄处(即裂隙闭合时)裂隙大小螺旋始终受一个要使它转向裂隙闭合的旋转力。要使裂隙大小固定,厂家一般是在旋钮内壁加一个毡垫,外有压紧弹簧,毡垫与仪器壁产生摩擦,以阻止其自行转动。


所以,裂隙大小不能固定时,只要旋紧压在毡垫的弹簧即可。若不行,可取下旋钮,换厚毡垫,以保证隙宽固定。


5. 如果移动小鼠不能观察到角膜和虹膜的两条反射光线,应检查光束的角度是否是 30°。

6. 如果小鼠瞳孔没有扩张,可以再滴 1 滴 1% 阿托品。如需麻醉,应谨慎麻醉剂剂量。


7. 如果眼睛检查时间延长,角膜变得干燥,眼睑会在一定时间内收缩从而影响状体的观察。

8. 为了避免观察过程中小鼠的尿液和粪便弄脏设备,在设备的相应位置覆盖一个塑料袋。打开裂隙灯,将照射的光带调整至最大的宽度弥散光照状态,小鼠无需麻醉,一只手抓牢小鼠放到裂隙灯光束下,另一只手操作操纵杆来回移动给小鼠眼聚焦,在观察过程中操作者的肘部和手应在一个固定位置。

来源:丁香实验

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