简介
卵细胞体外受精、发育实验的目的是检测超数排卵产生的卵细胞是否能够进行正常的受精过程。
材料与仪器
器材：
① 解剖器具
② 立体显微镜
③ 卵细胞培养箱。
试剂：
① 受精卵培养基；
② PMSG；
③ hCG；
④ 透明质酸酶。
步骤
卵细胞体外受精、发育实验的基本过程可分为如下几步：
A 卵细胞获取：用上述超排卵方法的（1）-（4）步操作方法获取卵细胞，放入特定的培养基中，于 37 ℃ 培养 12 小时。
B 精子采集：取 10 周左右的 B6 雄性小鼠，颈椎脱臼处死后，连同附睾一起取出睾丸，剪下附睾的上体部，用解剖针刺破后挤出精子，再用解剖针挑取精子放入特定培养基中，在体外受精前放入 CO2 培养箱中培养 1 小时。
C 体外受精：将培养 1 小时的精子悬浮液置于显微镜下检查精子活力和数量，然后用移液器按每个培养基液滴 10 μL（每微升约含精子 200 个）移入卵母细胞（50～100 个），放入 CO2 培养箱中培养 24 小时。
D 在体外受精后 5～7 小时，将培养皿从 CO2 培养箱中取出，用嘴吸式移液器将受精卵移入到新的培养基中，清洗两次，此时观测受精卵数目。剔除未正常受精的卵细胞，然后再放回 CO2 培养箱中继续培养。
E 将经 CO2 培养箱中培养 24 小时后，观测分裂至二细胞期胚胎的数目，将二细胞期胚胎用培养基洗两遍之后继续培养。
F 二细胞期胚胎培养至 72 小时之后，观测囊胚期胚胎出现的数目。
G 用 SPSS13.0 软件分析实验结果。
注意事项
1 体外受精操作时动作应尽量快，操作结束后迅速放入 37 ℃ 的 CO2 培养箱中。
来源：丁香实验
