简介
血清激素检测实验的目的是检测在促性腺激素诱导后,雌性小鼠体内相关性激素的水平是否有相应的变化。
材料与仪器
器材:
① 针头
② 注射器
③ 4 ℃ 离心机
④ 相关手术器材
⑤ 6 周龄实验组小鼠和对照组小鼠各 8 只
⑥ 24 日龄的实验组和对照组小鼠各 8 只
试剂:
① 雌二醇(estradiol)ELISA 试剂盒
② 助孕酮(progesterone)ELISA 试剂盒
③ 孕马血清促性腺激素(PMSG)
步骤
血清激素检测实验的基本过程可分为如下几步:
A. 准备 6 周龄雌性实验组和对照组小鼠各 8 只。同时也需要使用 24 日龄的实验组和对照组小鼠各 5 只,PMSG 注射后 48 小时进行实验。
B. 实施胸骨正中线切开术,心脏穿刺取血 1 mL。血液常温放置 30 分钟,使血清析出。
C. 以 3000 g 转速低温离心 15 分钟后,收集上层血清并储存于 -20 ℃ 冰箱以备后用。
D. 使用 ELISA 试剂盒分别检测血清 estradiol 和 progesterone 水平。具体操作详见试剂盒说明书。
E. 实验完毕后,用 SPSS13.0 软件分析实验结果。
注意事项
血清激素检测一般选用 6 周龄小鼠,实验组和对照组各 8 只。同时也需要使用 24 日龄的实验组和对照组小鼠各 5 只,PMSG 注射后 48 小时进行实验。最好同时取血、检测,避免冻存时间不同造成的差异。
来源:丁香实验