丁香实验_LOGO
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
丁香通
点赞
收藏
wx-share
分享

各时期卵泡数量统计实验

相关实验:雌性小鼠生殖生物学分析实验

最新修订时间:

简介

各时期卵泡数量统计实验的目的是检测卵巢的形态是否正常;检测卵巢中各时期卵泡的数量和形态是否正常。

材料与仪器

器材:


① 切片机


② 展片机


③ 包埋机


④ 立体显微镜。


试剂:

① PMSG;

② 脱水透明系列乙醇;

③ 4% 多聚甲醛(PFA);

④ HE 染色相关试剂。

步骤

各时期卵泡数量统计实验的基本过程可分为如下几步:

A 使用未经 PMSG 诱导的小鼠,实验组和对照组各 5 只,小鼠的年龄根据实验需求选取,通常先分析小鼠生育力开始消失或降低的时间点。同时也需要使用 24 日龄经过 PMSG 诱导后 48 小时的实验组和对照组各 5 只小鼠。

B 立体显微镜下取出小鼠巢,首先观察卵巢的形状、大小、表面光滑程度等,卵巢置于 4% 多聚甲醛固定 12 小时。

C 将固定后的组织进行系列乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,连续切片,切片厚度约为 8 μm,烤片及 HE 染色等,显微镜下观察并每隔 5 个切片计算出各级卵泡数量(包括原始卵泡,初级卵泡,次级卵泡,成熟卵泡,黄体等;含有能够观察到细胞核的卵母细胞的卵泡才计入数),计算总数做为整个卵巢中卵泡的数量。

D 用 SPSS13.0 软件分析实验结果。

E 取不同年龄的小鼠,找到卵巢开始发生变化的时间点,并追踪实验小鼠卵巢的变化过程,确定卵巢即将发生变化的时间点。对各个时间点的小鼠重复(1)-(4)的实验过程。统计小鼠卵巢功能的变化过程。

注意事项

1 解剖卵巢时注意不要损伤到卵巢的表面,为保证实验的准确性,切片均为连续切片。

来源:丁香实验

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序