简介
生物膜是细胞的重要结构，在真核细胞中它包括了包裹细胞的质膜和包裹细胞中内质网、线粒体、高尔基复合体、溶酶体等细胞器的内膜，其基本结构为脂类构成的脂质双分子层，各种蛋白质镶嵌其中完成诸如物质转运、酶反应、信号转导、结构连接等一系列功能，完整地反映生物膜在不同细胞中的结构及分布情况，对认识和了解细胞整体结构及功能具有重要意义。
原理
细胞完整生物膜系统观察实验的基本原理是根据宋今丹于 1984 年研制的可完整显示细胞生物膜系统全貌性结构的方法。该方法以高锰酸钾固定液固定完整细胞，由于固定液能够除去细胞内的蛋白成分，保留构成膜的脂类成分，结果是细胞内的细胞骨架及可溶性蛋白质被除去，增加了标本的透明度，同时将包括内质网、线粒体等在内的生物膜系统完整保存下来。高锰酸钾在固定标本过程中，高价锰被还原为二氧化锰而沉积于构成膜结构的脂类分子的亲水端，增加了标本的反差，使标本无需染色即可在相差显微镜下清晰显示细胞生物膜系统的全貌。
用途
细胞完整生物膜系统观察实验除了可在光学显微镜下进行细胞水平的生物膜系统观察外，还可与电镜技术结合，在透射电镜和扫描电镜下进行亚细胞水平的生物膜系统研究。
材料与仪器
器材：
盖片、染色缸、载片、吸水滤纸、吸管、普通光学显微镜、相差显微镜、CO2 培养箱、非洲绿猴肾细胞 CV-1。
试剂：
① PBS（pH7.2）;
② KMnO4 固定液
（柠檬酸三钠，60 mmol/L；氯化钾，25 mmol/L；氯化镁，35 mmol/L；高锰酸钾，125 mmol/L）。
步骤
细胞完整生物膜系统观察实验的基本过程可分为如下几步，以观察非洲绿猴肾细胞 CV-1 为例：
A 将培养的 CV-1 细胞接种于无菌盖片，24～48 h 后生长为单层。
B 取细胞盖片 1 张，用 PBS 漂洗 3 次，除去细胞表面培养液及杂质，滤纸吸去液体。
C 将新鲜配制的 KMnO4 固定液滴于细胞盖片，固定 5～7 min。
D PBS 小心漂洗盖片 5 次，去除残余固定液，滤纸吸去多余液体。
E 将盖片细胞面朝下置于载玻片上，镜下观察。
注意事项
1 高锰酸钾为强氧化剂，对细胞的作用较为强烈，易造成细胞变脆而影响观察，在实际操作中，应注意摸索和控制最佳固定时间，以获得较好的结果。
2 高锰酸钾固定液最好现用现配，也可将其保存于棕色玻璃瓶中，4 ℃ 可保存 8 周，室温保存 2 周。
来源：丁香实验
