原理
白磷还原法一般只能制备出单一颗粒直径的胶体金。因此，用于电镜双重标记或多重标记时此法显得有些不足，还需结合其他方法。Henegouwen 等（1986）发展了传统的白磷还原法，可制备出多种不同直径的胶体金，取得了良好的效果。这一方法的特点是通过循环还原的引入使原白磷还原法的适用范围得到扩大，其次，在循环还原过程中氯化金不再形成新的金颗粒，而只与原先的金颗粒结合，使它直径变大。原先加入的胶体金颗粒起着「晶核」的作用。因此可以利用这一方法制备出一系列颗粒直径不同但具有相同颗粒密度的胶体金来。
材料与仪器
步骤
1. 取 0.5 ml 新鲜配制的 20％ 饱和白磷乙醚溶液，加入到 60 ml 用上述方法制备的胶体金中（5.6nm±0.9nm）充分振摇 5 min 以上。
2. 将 1％ 氯化金 0.75 ml 及 0.1mol/L K2CＯ3 0.6 ml 加到上述溶液内，振摇数分钟溶液变成棕红色。
3. 将上液煮沸加热，直至变成鲜明的红色，一般需 10 min 上述还原过程使胶体金颗粒直径增大，随着还原次数的增加，胶体金颗粒的直径亦越来越大。
来源：丁香实验
