胶体金分散颗粒制备实验
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简介
胶体金可用多种方法制备，其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂，使金离子还原为金原子，可用于制备胶体金的还原剂有 50 余种，但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等，因此将重点介绍这三种还原剂制备胶体金分散颗粒的具体方法和步骤。
内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》
来源：丁香实验
操作方法
1. 取 1％ 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2CO3 1.2 ml，加入 120 ml 双蒸水。2. 上述溶液充分搅拌混匀 3 min 以上。3. 在搅拌条件下将 1 ml 新鲜配制的 20％ 饱和白磷乙醚溶液加入上述混合液中，约在 5 min 内溶液变为棕红色。4. 将上述混合液加热煮沸，直至变成鲜明的橙红色为止，一般约需 10 min。橙红色的出现表明氯化金的还原反应终止，胶体金
白磷还原法（改进）1. 取 0.5 ml 新鲜配制的 20％ 饱和白磷乙醚溶液，加入到 60 ml 用上述方法制备的胶体金中（5.6nm±0.9nm）充分振摇 5 min 以上。2. 将 1％ 氯化金 0.75 ml 及 0.1mol/L K2CＯ3 0.6 ml 加到上述溶液内，振摇数分钟溶液变成棕红色。3. 将上液煮沸加热，直至变成鲜明的红色，一般需 10 min 上述还原过程使胶体金颗粒直径增大，随着还原次数
柠檬酸钠还原法取 0.01％ 氯化金溶液 100 ml 加热至沸腾，迅速加入 4 ml 1％ 柠檬酸钠水溶液，可见溶液很快变蓝，然后继续加热至溶液由蓝变为橙红色为止。通过改变柠檬酸钠的用量可以制得不同颗粒大小的胶体金，因而显得十分方便。
鞣酸-柠檬酸钠还原法A 液（80 ml）：1％ 氯化金，1 ml；双重蒸馏水，79 ml。B 液（20 ml）：1％ 柠檬酸钠，4 ml；1％ 单宁酸，0.1 ml；25 mmol/L K2CＯ3，0.1 ml；双重蒸馏水，15.8 ml。将上述 A 液加热到 60℃，然后将 B 液快速加入到 A 液中，继续搅拌，在极短的时间内加热到煮沸（大约 10 min），此时颜色由黑-蓝-亮红（近似红葡萄酒颜色）变化。pH 调
乙醇-超声波还原法1. 取 1％ AuCl3 • HCl 水溶液 1 ml 加入 100 ml 双重蒸馏水。2. 用 0～2mol/L K2CO3 调 pH 至 7.2，再加入 1 ml 无水乙醇。3. 用 20 KC、135 W 超声波探头浸入溶液内进行超声振荡，此法制备的颗粒为 6～10 nm。
硼氢化钠还原法1. 取 0.6 ml 1％ 氯化金水溶液，加入 40 ml 预冷（4℃）双蒸馏水。2. 再加入 0.2mol/L K2CO3 0.2 ml。3. 边搅拌边加入新鲜配制的硼氢化钠水溶液（0.5 mg/ml）2 ml，至溶液由蓝紫色变为橙红色为止。然后继续搅拌 5 min，获得的金颗粒直径在 2～5 nm 之间。
放射性胶体金制备法1. 取 0.01％ AuCl3 • HCl 水溶液 100 ml，加热至沸腾。2. 加入 4 μl 195Au。 3. 迅速加入 4 ml 1％ 柠檬酸三钠水溶液，搅拌 5～7 min，至出现透明的橙红色。4. 其含量为脉冲数 1×106/min。
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