三氯醋酸沉淀法

1. 在 1ml 样品中至少要含有 5mg 蛋白质。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混匀；

2. 将蛋白质在冰浴中沉淀 30 min （或在冷冻箱内放置 15 min ）；

3. 10 000 ×g 离心 5 min；

4. 弃去上清并用吸管吸净残留液；

5. 将沉淀再悬浮于50～100％ 0.1N NaOH 溶液，混匀。

1. 用 TCA 沉淀蛋白质，所需最低的蛋白质浓度是 5 ug／ml。

2. 有时需要用 10％ TCA 或乙醇-乙醚（1：1）洗涤 TCA 沉淀的蛋白质，以除去 TCA。

3. 第 5 步不用 NaOH 溶液再悬浮 TCA 沉淀，而是用乙醇-乙醚（1：1 ）洗涤 TCA 沉淀 ，并用缓冲液再悬浮沉淀，可能更易操作。

4. 脱氧胆酸盐三氯醋酸（DOC-TCA）沉淀法是 TCA 沉淀法的一种变通形式，它可用于浓度 为 1 ug／ml 以下的蛋白质浓缩，该法使用范围更广。

1 ml 样品加 0.1 ml 0.15％ DOC。

混匀并在室温下放置 10 min。

加 50 ul 100％ TCA，混匀并在 10 000×g 离心 5 min。

DOC-TCA 沉淀反应不能在 SDS 存在的条件下进行。