酶消化法从Wharton胶中分离干细胞

(a)脐带取材后，可在PBSA中保存1〜24h。

(b)除去血管，将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。

(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管，用无血清DMEM洗，室温250g离心5min。

(d)倒掉上清液，将离心后的沉淀物拍散，浸泡在0.1%胶原酶（大约是沉淀物体积的3倍）中，37℃消化16〜18h。

(e)加人适当体积的PBSA(消化液体积的2倍），室温250g离心5min。

(f)倒掉上清液，加2.5%胰蛋白酶（大约是沉淀物体积的2倍）37℃处理30min，轻轻搅动。

(g)加人适当体积的FBS(消化酶体积的10%)中止胰蛋白酶作用。

(h)用培养基洗。

(i)用培养基重悬分离得到的细胞，按大约1×10³细胞/cm密度将细胞接种到培养瓶中。