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细胞质(S-100)组分的制备(从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物)

相关实验:从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物

最新修订时间:

材料与仪器

细胞质提取物
10× 细胞质提取缓冲液
Beckman 50型固定角转子或相当的转子

步骤

1) 仔细测量细胞质提取物的体积(见基本方案步骤 7 中的上清)。加入 0.11 倍体积的10×细胞质提取缓冲液,充分混合。

2)100 000 g 离心 1 h。

3)将上清(± 100) 装入透析管中进行透析,直至与S-100 的电导率达到与透析缓冲液一致(100 mmol/L KCL)。

4)从透析管移出上清(±100),25000 g 离心 20 min,以收集沉淀组分。

5)轻轻倒出上清,检测其电导率并测定蛋白质浓度。分装入小管中,液氮中快速冷冻,-80℃保存。

来源:丁香实验

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