技术和方案4 酵母蛋白质的抽提

NaOH PAGE 样品缓冲液 Tris-HCl 甘油 β-巯基乙醇 溴酚蓝

1.从液体培养物中或用细菌接种环在平板表面刮菌，收集大约 2.5 OD的细胞量（大约 2.3 mg 湿重）。将细胞重悬于 100ul 蒸馏水中，加入 100ul O.2mol/L NaOH，将样品室温放置 5 min。

2.离心沉淀样品，并将其重悬于 50ul PAGE 样品缓冲液中。将样品于沸水中煮 3 min 并再次离心沉淀。用移液器吸取含有蛋白质的上清，每个泳道用 6ul 上清上样，在小型凝胶上电泳分离蛋白质。

3.若要用 Bradford 法测蛋白质浓度，则将样品以 1:3000 稀释。