流 感 病 毒

基 本 方 案 1 流感病毒鼻腔内感染麻醉的小鼠

这种方法可以建立所有呼吸道感染（鼻 、气管、肺）。

材料

6〜8 周 龄 小 鼠（如 B A L B /c)

I X l O ²〜I X l O ⁵ T CID5()/m l 流 感 病 毒（见辅助方案 2 和 4 滴定）

1 . 安全固定 6〜8 周 龄 小 鼠（附 录 2 0 , 氯胺酮/赛 拉 嗪 麻 醉（附 录 2D )。

如 果 实 验 需 要 定 量 测 定 肺 脏 病 毒 滴 度 ，应 避 免 使 用 吸 入 麻 醉 剂 ， 因 为 它 们 对 纤毛 的 抑 制 作 用 影 响 病 毒 的 清 除 。

2 . 捏住麻醉小鼠的背部使其头部向后倾斜，鼻 腔 向 上（目的是暴露鼻腔，使病毒更稳定地进入呼吸道）。应用移液管每侧鼻孔滴入 IOul I X I O ²〜IX I O ⁵T C I D 50/m l 流感病
毒 。保持小鼠此体位 15s，使病毒进入肺内。

3 . 将小鼠腹部置于温暖的地方使其恢复。

流 感 病 毒 可 在 同 一 笼 内 鼠 与 鼠 间 传 播 。 一 般 同 一 实 验 组 的 小 鼠 可 在 同 一 笼 内 饲养 。应 用 这 种 方 法 使 小 鼠 互 相 感 染 ， 同 时 增 强 了 病 毒 的 毒 力（见 基 本 方 案 2 ) 。

4 . 保存一份病毒样本以确定其滴度（见辅助方案 2)。

备 选 方 案 流 感 病 毒 鼻 腔 内 感 染 未 麻 醉 小 鼠

用这种方法，最初的感染仅限于上呼吸道，病毒将于 3〜5d 内播散到气管及肺。

材 料 见 基 础 方 案 1

1 . 安全抓取和控制 6〜8 周 龄 小 鼠（附 录 2D ) ，防止其干扰操作。

2 . 捏住小鼠的背项部使其头部向后倾斜，鼻 腔 向 上（目的是暴露鼻腔，使病毒更稳定地进入鼻内）。应用移液管缓慢向两侧鼻孔滴入 I X IO²〜I X IO⁵T C I D 50/m l 流感病毒
1 〇 ul, 使小鼠能将病毒充分地吸入到鼻腔内，然后再感染下一只小鼠。

在 进 行 鼻 腔 内 感 染 时 两 人 合 作 明 显 比 一 人 有 效 ，一 人 抓 取 并 固 定 小 鼠 ， 另一 人操 控 病 原 滴 注 。

辅 助 方 案 1 流感病毒在鸡胚中扩增

材料

9〜lld、无特异性致病原感染的鸡胚（SPA F A S 或 H y -Vac)

5000U /5 mg/ml (分别）青/链霉素溶液

I X IO³T C I D 50/ m l 流感病毒原液