用银染的方法无放射性的分析 SSLP

PCR 扩增 SSLP 的变性聚丙烯酰胺凝胶
乙醇 硝酸 硝酸银染色溶液 显色液 乙酸
Whatman 滤纸 染色仪器 80℃真空电炉

1.电泳后，小心的打开仪器，分开玻璃板。将有胶的那块板子放于染色一起的底部，仔细地将上面的架子和垫圈放置于胶边缘的上面，拧紧闩子。

胶里如果有小空隙的话将会使溶液从胶和玻璃板间流出，可以通过加（逐滴注入）一点含有高农度过硫酸铵的 Sequagel-6(NationalDiagnostics) 将缝隙填满，胶将会快速地聚合。

2.在 10% 的乙醇里洗胶 5 min，然后倒掉乙醇，在 1% 的硝酸溶液里氧化胶 3 min，倒掉硝酸溶液。用水漂洗胶 5s，然后倒掉水。

3.加硝酸银染液，盖好一起以防透光，染 20 min 后，倒掉硝酸银溶液并按安全的规章制度处理这些溶液，用水漂洗胶 5 min 后倒掉。

4.加显色液还原胶（溶液最初的颜色是黄褐色），轻轻地晃动染色仪使溶液没过胶，倒掉再加人新鲜的显色液，直到溶液不再改变颜色，溶液变清（溶液变清大约 2 min 后，条带将开始显现）。

5.在条带开始显现而胶边棕色前将展开液倒掉（避免展开过度），在 10% 乙酸中、浸泡 1 Imin 终止展开，倒掉乙酸溶液，用水漂洗 5s。

6.将 Whatman 的滤纸直接放到胶上，轻轻地把胶从玻璃板上转移到滤纸上，直空干胶 lh，记录结果。切掉多余的胶保存有结果信息的部分（真空抽干的胶可以 2 年而没明显的信息丢失）。