材料与仪器
牛小肠碱性磷酸酶 羧肽酶Y 目标磷酸化蛋白 TPCK 修饰的膜蛋白酶
乙酸 EDTA FeCl3 NH4HCO3 MALDI 基质 镍-次氨基三乙酸(Ni-NTA)树脂 柠檬酸钠
致密的反应柱子(CRC) 过滤器 孵育器 MALDI 质谱仪 MALDI 靶板 微量离心管
乙酸 EDTA FeCl3 NH4HCO3 MALDI 基质 镍-次氨基三乙酸(Ni-NTA)树脂 柠檬酸钠
致密的反应柱子(CRC) 过滤器 孵育器 MALDI 质谱仪 MALDI 靶板 微量离心管
步骤
一、固定化金属离子亲和柱的制备
二、磷酸化多肽与 IMAC 柱的结合
三、碱性磷酸酶处理亲和结合的磷酸化多肽
四、羧肽酶 Y 消化亲和结合的磷酸化多肽
五、质谱
来源:丁香实验