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方案8 邻亚碘酰苯甲酸在色氨酸处切割实验

相关实验:电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

最新修订时间:

材料与仪器

冻干的蛋白质
对甲酚 冰醋酸 盐酸胍 邻亚碘酰苯甲酸
体积排阻层析柱 浓缩器 氮气

步骤

1.将邻亚碘酰苯甲酸 10 mg 溶解于 1.Oml 的 80% (体积分数)乙酸,瘠液中含有 4mol/L 盐酸胍和 20ul 对甲酚。

2.混合物在室温下孵育 2 h。

3.加入蛋白质,使终浓度为 5~10 mg/ml。以氮气流中冲洗试管,室温于黑暗中孵育 24 h。

4.加入约 10 倍体积的水终止反应,用 SpeedVac 浓缩器(或其他类似设备)干燥。或者,通过直接将消化产物装载到体积排阻层析柱(size-exclusioncolumn) 上,以获得肽段。

来源:丁香实验

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